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一旺百旺

新虫 (著名写手)

[求助] 测序的时候测序要求的选项怎么选? 已有6人参与

测序要求有六个选项:
正向
反向
双向
单向
单向测通
双向测通
这六个选项都有什么区别呀,,,完全不懂,求教。。。。越详细越好。。。完全的菜鸟一个
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zuoyly

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-13 22:52:10
看说明书吧,正向反向差不多,没有什么区别;双向就是一个正向一个反向,然后对结果进行整合;单向就是单向测,没有双向测精确;一般测序超过800就测不准了,需要设计中间引物什么的,这就是测通吧。。。
8楼2014-08-12 11:08:19
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bolysu

禁虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-08-11 20:15:05
本帖内容被屏蔽

2楼2014-08-11 17:59:21
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未婚

金虫 (正式写手)

小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币-1, 屏蔽内容, 乱码 2014-08-13 22:49:38
本帖内容被屏蔽

3楼2014-08-11 20:13:01
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-13 22:50:06
如果你自己提供测序引物,就不存在这个问题了(测序引物决定了方向)。如果用公司的引物,则会有这个问题。就一般测序而言,测一个方向就够了。
如果你要测定目标片段不是很大(如500bp左右),不管是正向还是反向都可以全部读出了。所以选正向和反向没有本质区别。
如果你的目标DNA较大,而且需要全部测出序列,这时则可能需要正反方向同时测,以便把整个顺序都读出。
如果你做的是点突变或其他突变体,而突变位置又距离上下游插入点较远,则可以在突变位置附近合成一测序引物,便于测序。
4楼2014-08-11 21:13:56
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