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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家测序时送样量
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duanepp

木虫 (小有名气)

[交流] 大家测序时送样量 已有8人参与

如题，大家送到公司测序时一般都送多少的样？25ul？
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1楼 2013-01-07 15:28:09
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-07 16:58:33
我下面讲的，紧限于质粒测序
不要这么多的，我一般200ng/ul的质粒送15ul测两个反应，其实测序公司跟我讲过，可以适当多送点，首先样品拿回去他们要先跑电泳检测样品质量，然后要是第一次没有测好，他们还可以有多余的样品进行调整测序，不至于再向客户索要，一般15ul上面的所有步骤够用了
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-01-07 15:39:25
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我一般就取1ML新鲜菌液，直接寄过去的
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3楼2013-01-07 16:59:32
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duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-07 15:39:25
我下面讲的，紧限于质粒测序
不要这么多的，我一般200ng/ul的质粒送15ul测两个反应，其实测序公司跟我讲过，可以适当多送点，首先样品拿回去他们要先跑电泳检测样品质量，然后要是第一次没有测好，他们还可以有多余 ...

pcr产物测序呢？
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4楼2013-01-07 17:36:26
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般测序公司都会有具体要求的，按要求准备即可。我用的测序公司要求送样20微升，对于质粒，30-100 ng/ul，PCR产物10-50 ng/ul
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2013-01-07 22:04:28
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ixido

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送质粒的话。100ng/uL 10uL就可以了，这个量公司至少可以测两次。
PCR产物我一般都送10uL 100ng/uL，这样公司可以在跑测序之前做一个预实验。
其实测序样品对于浓度的要求并不是很高，重要的是你的质粒或者PCR产物的质量，高质量的质粒即使浓度不高也能测的非常好。
当然，如果楼主实在是不想提质粒或者做PCR产物回收，就直接送菌液或者PCR产物就好了。
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6楼2013-01-08 09:27:42
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luckysx

新虫 (初入文坛)
★
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PCR产物直接送样吗？我觉得最好纯化后送样，公司的纯化不如自己的来的好。双向测序的话，15微升绝对够了。
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7楼2013-01-08 10:37:21
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
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我一般一次测序质粒7μl，PCR回收纯化产物10μl。当然这跟你产物的浓度关系很大。
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8楼2013-01-08 13:27:28
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Renavatio

木虫 (小有名气)
★
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我一般都是送的菌液或者质粒    菌液一般送个500ul，质粒的话 公司要求100ng/ul  10ul,经常把质粒稀释了之后再给他
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Undefined！
9楼2013-01-08 15:53:02
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dongrh1981

金虫 (正式写手)
★
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一般菌液送100ul，让测序公司帮忙扩大培养抽质粒，最后质粒和测序结果一起返还！
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呼吸的痛
10楼2013-01-08 16:03:27
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