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chenyanzhen

铁虫 (小有名气)

[求助] 有引物序列,却找不到对应的目的序列 已有2人参与

在文献中找到两对引物序列,但是在ncbi-blast中却找不到其P的序列,哪位高手帮帮忙,急用!
PF1(5-3):-GTCTGGTAGCACTGCTTCA-
PR1(5-3):-GTCGGTTGCTGGTGCAAAA-
PF2(5-3):-GTCTGGTAGCACTGCTTCA-
PR2(5-3):-GTCGGTTGCTGGTGCAAAA-
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenyanzhen: 金币+12, ★★★很有帮助 2014-08-07 11:21:40
在文献中看到一对引物序列,如何知道该对引物扩增产物的大小及序列?方法如下:
1.打开blastn页面,在输入框中依次输入上游引物序列、50-150个n、下游引物的反向互补序列,在下面organism框中输入物种拉丁名。
有引物序列,却找不到对应的目的序列
2.在下面program selection选项中选择Somewhat similar sequences (blastn)项。
有引物序列,却找不到对应的目的序列-1
3.点击blast,结果出来后,查看两边粗黑线、中间有灰色细线连接的比对结果,如下图中红框中所示。
有引物序列,却找不到对应的目的序列-2
4.根据比对结果即可知道该对引物扩增的基因名称、序列及产物大小。如该例中所示:扩增产物为 large subunit ribosomal RNA gene的一段,大小为800-578+1=223bp
有引物序列,却找不到对应的目的序列-3
12楼2014-08-05 22:21:20
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