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[求助]
转录组基因克隆求助！！！急急急！！！
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| 前段时间我们实验室进行了转录组测序，两个品种，一个耐盐一个相对不耐，测序后准备寻找差异基因。测序结果是公司进行组装并比对的，他们给我们找出了一些具有表达差异的基因，并且有对应的序列，这些序列我在NCBI上blast过，几乎都能和其他的物种比对上。然后我根据他们给出的序列设计引物，奇怪的是不论是这序列的全长还是只是一个片段都不能扩增出来，这是为什么呢？之前我请教过可能是公司拼接的问题，但除了拼接问题外还有没有其他可能性呢？而且如果是拼接问题，为什么又能跟其他物种比对上呢？求解求解求解。 |
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