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well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 有cds序列和全基因组序列,如何设计引物来克隆和表达!已有4人参与

我想对一个酶基因进行克隆和表达,现在知道这个酶基因的cds序列,以及这个菌的基因组序列,请问如果我想得到这个基因,在设计引物的时候应该怎么做?这方面我是菜鸟,本来就想用这个cds序列两端设计引物的,但是看大家有的说什么要找到保守序列,也有的说只用cds序列就行,只用cds的话以后会不会影响到表达呢?哎呀,我说的没有条理,见谅啊,大家放假了,实在心里很着急,还望高手给予指导!越详细越好!
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 未婚 at 2014-07-16 18:23:26
要是拿去测序的话至少前后留50bp的测不准区域吧,只有先慢慢做出来测序了再看吧 祝你顺利!...

楼主,help,克隆的引物,从ATG开始发夹结构,往前走一段,大致走多少个合适引物20bp往前走了12bp是不是走的有点多,
踏实
10楼2014-07-17 11:26:18
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 未婚 at 2014-07-17 17:01:05
不多  先做吧 这样的话测序预留一点   从ATG发夹结构是什么意思啊?...

不好意思,表达不够清楚,就是说,楼主帮忙看这个帖子http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7667445&pid=10#pid10
踏实
14楼2014-07-17 20:05:11
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