| 查看: 2195 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
wenzi6337木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助SMART RACE ，5‘-RACE问题 已有4人参与
|
||
| 如题，我在做SMART RACE时首先用随机引物和通用引物合成cDNA，然后以cDNA为模板用Short2引物和CDS特异性引物扩增，切胶回收500-700bp条带，连pMD-18T载体测序，问题是，测序结果显示有片段连入，但不是我要找的CDS序列，请教各位大侠，是什么地方出了问题？为什么CDS引物扩出无关条带？是引物特异性差吗？请了解SMART RACE的大侠指点一二，不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有169人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 5‘ RACE时片段不完整
已经有9人回复
- 5‘Race验证miRNA靶点的原理
已经有40人回复
- 3‘RACE实验好不好做
已经有12人回复
- 3‘RACE电泳结果
已经有10人回复
- 5‘race的反转录
已经有4人回复
- 紧急求助5‘RACE（测序结果问题）
已经有10人回复
- 跪求Clontech公司的SMARTer™ RACE cDNA Amplification Kit中文说明书
已经有7人回复
- 关于RACE技术~~~~
已经有6人回复
- RACE实验中的 GC-Rich 问题
已经有14人回复
- clontech的RACE-PCR试剂盒
已经有9人回复
- 【求助/交流】5'RACE试剂盒的选择？
已经有9人回复
- 【求助/交流】RACE引物设计
已经有5人回复
- 【求助/交流】用SMART技术得到一个基因的5‘ RACE后，是不是就知道该基因的转录起始位
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助~关于引物降解问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】5-RACE问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】RACE 引物
已经有4人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenzi6337: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢啊！ 2014-07-09 14:01:18
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-07-09 16:07:35
感谢参与，应助指数 +1
wenzi6337: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢啊！ 2014-07-09 14:01:18
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-07-09 16:07:35
| 为了保障你的RACE能够特异性，请设计多条引物，有种方法叫做 Asymetric PCR with nested primer。即，先用你的specific 引物1 单引物扩增10-50个cycle，然后再用新的specific 引物2 （引物2的位置应该在引物1的上游）和5‘ 末端引物进行正常PCR扩增。 祝好！ |
3楼2014-07-09 13:58:19
Fleaves
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 18980.6
- 散金: 526
- 红花: 42
- 帖子: 2644
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1473397
- 注册: 2011-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
2楼2014-07-09 11:30:48
wenzi6337
木虫 (著名写手)
- 应助: 27 (小学生)
- 金币: 3267.6
- 散金: 196
- 红花: 7
- 沙发: 1
- 帖子: 1364
- 在线: 413.8小时
- 虫号: 716576
- 注册: 2009-03-06
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
4楼2014-07-09 13:59:51
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2014-07-09 19:25:08
