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求助SMART RACE ,5‘-RACE问题
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wenzi6337
木虫
(著名写手)
应助: 27
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在线: 413.8小时
虫号: 716576
注册: 2009-03-06
性别: GG
专业: 植物生理与生化
[
求助
]
求助SMART RACE ,5‘-RACE问题
已有4人参与
如题,我在做SMART RACE时首先用随机引物和通用引物合成cDNA,然后以cDNA为模板用Short2引物和CDS特异性引物扩增,切胶回收500-700bp条带,连pMD-18T载体测序,问题是,测序结果显示有片段连入,但不是我要找的CDS序列,请教各位大侠,是什么地方出了问题?为什么CDS引物扩出无关条带?是引物特异性差吗?请了解SMART RACE的大侠指点一二,不胜感激!
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1楼
2014-07-09 09:58:07
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Fleaves
至尊木虫
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虫号: 1473397
注册: 2011-11-02
性别: GG
专业: 植物病理学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wenzi6337(myprayer代发): 金币+1, 鼓励发帖积极交流。
2014-07-09 13:15:09
wenzi6337: 金币+5,
★
有帮助
2014-07-09 13:58:09
你说对了,你的引物特异性差
RACE这个东西不好做,慢慢练吧
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2楼
2014-07-09 11:30:48
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