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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】5'RACE试剂盒的选择？
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oloing

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】5'RACE试剂盒的选择？ 已有9人参与

我打算做5‘RACE。查了一些资料，现在用得比较多的是clontech的smart技术试剂盒或者invitrogen的mRNA5’端加接头技术。

据我分析，clontech的smart技术试剂盒的优点是实验流程简单，避免对RNA样品的反复操作，缺点是RNA末端的特异性完全依赖锚定引物，如果有截短的mRNA分子，会出现常呈现不清晰的成片条带或截短的产物背景，即特异性不高，估计会对后期的结果判断和鉴定工作造成麻烦。而invitrogen的mRNA5’端加接头技术的优点是CIP首先筛除了不完整的mRNA分子，TAP脱帽，加接头后扩增如能得到阳性结果，则特异性相对较高，同时，缺点是操作复杂，要对RNA分子反复纯化三次之多，这过程中也难保不出问题。

所以我在这两种试剂盒的选择问题上犹豫不定，因为没有经验，不知道该选择哪种。我想问用过clontech的前辈，是否真的弥散带或者多条带是最常见的结果？最后阳性克隆测序时候，要测多少克隆才能得到想要的结果？而用过invitrogen的前辈，过程是不是像我想的那么复杂，都有些什么问题出现呢?

请大家给点建议！
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我们从事科学是出于对艺术的热爱
1楼 2010-11-09 16:37:50
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-11-09 19:09:16
选clontech的smart吧，我之前用的TAKARA的，也就是去磷酸化、去帽子、加接头，颠来倒去一天过去什么都没有了，反复失败。还是操作流程短一点比较好，成功几率高。我现在买了个clontech的smart试剂盒，TAKARA的太差劲了， 不用 了
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
2楼2010-11-09 19:01:33
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zheng20089829

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用的也是clontech的，效果还不错的
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3楼2010-11-09 20:05:19
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还是clontech的效果比较好一些，TAKARA的操作比较复杂，最后效果也不好
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4楼2010-11-09 21:30:25
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oloing

铜虫 (初入文坛)
★
silicare(金币+1):期待你回来跟大家分享你的结果 2010-11-11 13:12:20
谢谢大家的建议，我已经订了clontech的试剂盒了，真的很贵，希望能做出来吧
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我们从事科学是出于对艺术的热爱
5楼2010-11-11 09:54:40
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magy2006

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做实验就是砸钱、再砸钱
呵呵
不是自己的钱不要紧
不砸钱老板说你不干事
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6楼2010-11-11 13:29:11
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aqingkl

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
lz,请问一下这个试剂盒的价格大概是多少啊、你做了之后感觉效果怎么样呢
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7楼2012-09-07 20:41:43
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1906840楼: Originally posted by 阳光金鱼唐 at 2010-11-09 19:01:33
选clontech的smart吧，我之前用的TAKARA的，也就是去磷酸化、去帽子、加接头，颠来倒去一天过去什么都没有了，反复失败。还是操作流程短一点比较好，成功几率高。我现在买了个clontech的smart试剂盒，TAKARA的太差劲 ...

clontech也是TAKARA的
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仕不可不弘毅，任重而道远
8楼2012-09-08 10:46:34
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chenxiang29

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by oloing at 2010-11-11 09:54:40
谢谢大家的建议，我已经订了clontech的试剂盒了，真的很贵，希望能做出来吧

how much  ？
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smile to the world
9楼2013-10-20 14:55:21
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猪八戒0305

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by oloing at 2010-11-11 09:54:40
谢谢大家的建议，我已经订了clontech的试剂盒了，真的很贵，希望能做出来吧

多少钱？
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10楼2015-05-05 19:35:59
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