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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 求助SMART RACE ，5‘-RACE问题
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wenzi6337

木虫 (著名写手)

[求助] 求助SMART RACE ，5‘-RACE问题 已有4人参与

如题，我在做SMART RACE时首先用随机引物和通用引物合成cDNA，然后以cDNA为模板用Short2引物和CDS特异性引物扩增，切胶回收500-700bp条带，连pMD-18T载体测序，问题是，测序结果显示有片段连入，但不是我要找的CDS序列，请教各位大侠，是什么地方出了问题？为什么CDS引物扩出无关条带？是引物特异性差吗？请了解SMART RACE的大侠指点一二，不胜感激！
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1楼 2014-07-09 09:58:07
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenzi6337: 金币+2, ★有帮助 2014-07-10 00:09:47
你可能没完全理解smart，更没理解race，前面的双链都没做好，后面得引物设计也很关键，扩增目的片段需要采用合适的策略，你必须把每一样都做实了，才能OK

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-07-09 19:25:08
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