24小时热门版块排行榜    

查看: 886  |  回复: 4

梦-妖精

铁虫 (初入文坛)

[求助] 5‘race的反转录

1、我用的是takara的5’race试剂盒,前面去磷酸化反应,干燥沉淀的时候,没有在冰上操作,会不会影响RNA啊?因为说明书上也没说要在冰上操作,所以我也没有在冰上干燥去磷酸化的RNA。
2、经过去磷酸化、去帽子反应之后,到了反转录的地方,里面说dNTP要加1微升,我不小心加了2微升,别的没有变,就是总体积应该是10微升,现在是11微升,这样对我的反转录得到的cDNA会有影响吗?
请大家指教~~多谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TAKARA的试剂盒没用过,楼主为啥不用宝日医(克隆达,现被TAKARA兼并)的试剂盒?既然你已经得到cDNA,为啥不接着往下做?做了才知道你的cDNA灵不灵?
2楼2012-10-19 22:12:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦-妖精

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-19 22:12:42
TAKARA的试剂盒没用过,楼主为啥不用宝日医(克隆达,现被TAKARA兼并)的试剂盒?既然你已经得到cDNA,为啥不接着往下做?做了才知道你的cDNA灵不灵?

恩,是导师选的试剂盒,我也没有发言权啊~我引物还没回来呢,就是怕操作上有问题,结果会不如人意~也可能cDNA好使,但是就是扩增不出来呢,那样就不知道是哪里出了问题了,所以我要先保证,我做的这些不会影响我的cDNA~
3楼2012-10-19 22:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

扩基因要一气呵成的。最好不要中断。RNA没降解,就一定能扩出基因来的。祝你好运。做不出来再重做。没必要犹豫
4楼2012-10-19 23:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦-妖精

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-19 23:02:05
扩基因要一气呵成的。最好不要中断。RNA没降解,就一定能扩出基因来的。祝你好运。做不出来再重做。没必要犹豫

这个RNA提的超级亮,导师不给买贵的,我只能用现有的,操作是很麻烦,所以就怕哪个步骤没在冰上操作,RNA会有所影响~
5楼2012-10-19 23:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 梦-妖精 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见