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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于5‘RACE，求助经验~
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让心去散步

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于5‘RACE，求助经验~ 已有9人参与

要克隆基因，拿到CDS的全长，老师让做5‘RACE，我是新手中的新手，请有经验的大虾们给我些指点吧~~
关于模板，关于体系，关于结果分析。。。。。。谢谢了~
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1楼 2011-01-11 11:38:08
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aaron2012

银虫 (初入文坛)
★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2011-01-11 12:10:42
先做5race,你是做已知基因吗  
做基因引物最重要   其他都还好
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生物，特别是分子生物，贵在坚持！
2楼2011-01-11 11:48:03
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让心去散步

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by aaron2012 at 2011-01-11 11:48:03:
先做5race,你是做已知基因吗  
做基因引物最重要   其他都还好

是一个已知基因，全长及CDS的序列都有的，因为有同学也做5‘RACE，做了8个月，而我只有1个半月左右的时间，所以很担心啊
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3楼2011-01-11 11:56:22
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aaron2012

银虫 (初入文坛)
★
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有序列了        那我建议你好好学习一下引物的设计       应该没有问题   祝你好运
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生物，特别是分子生物，贵在坚持！
4楼2011-01-11 18:57:46
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
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还有就是模板要好，最好借师兄师姐的用。如果是你自己提RNA……就不好说了
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5楼2011-01-11 19:44:01
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让心去散步

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-01-11 19:44:01:
还有就是模板要好，最好借师兄师姐的用。如果是你自己提RNA……就不好说了

这个，我是开拓者，估计是师弟师妹用我的，另外，我提RNA是用OMEGA的试剂盒，质量应该没有问题，实验指导是个博士，可是因为太忙，没有时间指导我。。。杯具了
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6楼2011-02-15 20:12:09
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我是果果

新虫 (初入文坛)
★
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学习来了
我最近这几天也在做5'RACE,也都一直没出结果,烦死了
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7楼2011-02-15 20:29:02
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sthink

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道你用的是哪个试剂盒，我当初用的是TAKARA的，它对引物设计上有一定得要求，镁离子的浓度也很重要，低了就扩不出来。
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8楼2011-02-16 10:45:23
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江流

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 让心去散步 at 2011-01-11 11:38:08:
要克隆基因，拿到CDS的全长，老师让做5‘RACE，我是新手中的新手，请有经验的大虾们给我些指点吧~~
关于模板，关于体系，关于结果分析。。。。。。谢谢了~

5‘RACE用GENE RACER这个盒子还是比较保险的，最关键的还是5’接头的连接，那几步一定要严格，其他的问题不大。
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江流天地外山色有无中
9楼2011-02-18 16:04:58
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cxt86

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-18 20:35:12
5‘RACE  我觉得试剂盒如果好的话  其他的都可以很快学会  以前用TAKARA的 反复做了好久，后来换了clontech方便多了
模板很重要，RNA质量高，反转录严格操作，有助于获得好的模板
设计巢式引物可以同时设计2对引物，交叉组合可以有4种搭配，可以省钱。。。
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10楼2011-02-18 18:00:43
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