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【求助/交流】关于5‘RACE,求助经验~
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让心去散步
铁虫
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【求助/交流】关于5‘RACE,求助经验~
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要克隆基因,拿到CDS的全长,老师让做5‘RACE,我是新手中的新手,请有经验的大虾们给我些指点吧~~
关于模板,关于体系,关于结果分析。。。。。。谢谢了~
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2011-01-11 11:38:08
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aaron2012
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2011-01-11 12:10:42
先做5race,你是做已知基因吗
做基因引物最重要 其他都还好
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2楼
2011-01-11 11:48:03
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让心去散步
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Originally posted by
aaron2012
at 2011-01-11 11:48:03:
先做5race,你是做已知基因吗
做基因引物最重要 其他都还好
是一个已知基因,全长及CDS的序列都有的,因为有同学也做5‘RACE,做了8个月,而我只有1个半月左右的时间,所以很担心啊
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3楼
2011-01-11 11:56:22
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aaron2012
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有序列了 那我建议你好好学习一下引物的设计 应该没有问题 祝你好运
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4楼
2011-01-11 18:57:46
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gaoyang636
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还有就是模板要好,最好借师兄师姐的用。如果是你自己提RNA……就不好说了
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5楼
2011-01-11 19:44:01
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gaoyang636
at 2011-01-11 19:44:01:
还有就是模板要好,最好借师兄师姐的用。如果是你自己提RNA……就不好说了
这个,我是开拓者,估计是师弟师妹用我的,另外,我提RNA是用OMEGA的试剂盒,质量应该没有问题,实验指导是个博士,可是因为太忙,没有时间指导我。。。杯具了
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6楼
2011-02-15 20:12:09
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学习来了
我最近这几天也在做5'RACE,也都一直没出结果,烦死了
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7楼
2011-02-15 20:29:02
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sthink
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不知道你用的是哪个试剂盒,我当初用的是TAKARA的,它对引物设计上有一定得要求,镁离子的浓度也很重要,低了就扩不出来。
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8楼
2011-02-16 10:45:23
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让心去散步
at 2011-01-11 11:38:08:
要克隆基因,拿到CDS的全长,老师让做5‘RACE,我是新手中的新手,请有经验的大虾们给我些指点吧~~
关于模板,关于体系,关于结果分析。。。。。。谢谢了~
5‘RACE用GENE RACER这个盒子还是比较保险的,最关键的还是5’接头的连接,那几步一定要严格,其他的问题不大。
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江流天地外山色有无中
9楼
2011-02-18 16:04:58
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cxt86
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-18 20:35:12
5‘RACE 我觉得试剂盒如果好的话 其他的都可以很快学会 以前用TAKARA的 反复做了好久,后来换了clontech方便多了
模板很重要,RNA质量高,反转录严格操作,有助于获得好的模板
设计巢式引物可以同时设计2对引物,交叉组合可以有4种搭配,可以省钱。。。
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10楼
2011-02-18 18:00:43
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