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xll1107

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】BD SMART RACE cDNA Amplification kit 做5 RACE已有4人参与

有没有 哪位xdjm用过clotech的BD SMART RACE cDNA Amplification kit ,或者是做过5‘race的。

看了半天说明书,有个问题不是很清楚,说明书里说到“尽管我们使用BD SMART RACE Kit成功地得到了大于6.5 kb扩增产物,但为了使你的5'-和3'-RACE 产物达到2 kb,建议对引物加以筛选。”

问题:这句话什么意思?是说如果我做5’race,最好设计能产生2000bp片段的特异引物吗?不能扩短一些吗?我担心太长的片段不好扩增?
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木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没必要太苛求,按照引物的设计要求,长度在26-28Bp,Tm在70左右,GC含量50-60%,一般都没什么问题,另外最好使用推荐的ADVANTAGE 2 POLYMERASE很好使的
2楼2010-07-14 16:17:03
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段家一凡

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该不是要求2K的片段,其实越短应该越好,他的意思可能是不能太长。
3楼2010-07-14 16:31:17
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xll1107

银虫 (小有名气)

谢谢楼上的2位。
今天在clontech的网站 找到了传说中的smart 升级版,smarter,呵呵,又要再学习说明书了
4楼2010-07-15 09:17:34
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aqingkl

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lz我也要做5RACE,BD SMART RACE cDNA Amplification kit这个试剂盒好使吗,价格怎么样
5楼2012-09-07 20:38:18
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