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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】BD SMART RACE cDNA Amplification kit 做5 RACE
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xll1107

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】BD SMART RACE cDNA Amplification kit 做5 RACE 已有4人参与

有没有 哪位xdjm用过clotech的BD SMART RACE cDNA Amplification kit ，或者是做过5‘race的。

看了半天说明书，有个问题不是很清楚，说明书里说到“尽管我们使用BD SMART RACE Kit成功地得到了大于6.5 kb扩增产物，但为了使你的5'-和3'-RACE 产物达到2 kb，建议对引物加以筛选。”

问题：这句话什么意思？是说如果我做5’race，最好设计能产生2000bp片段的特异引物吗？不能扩短一些吗？我担心太长的片段不好扩增？
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1楼 2010-07-14 10:49:08
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695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没必要太苛求，按照引物的设计要求，长度在26-28Bp,Tm在70左右，GC含量50-60%，一般都没什么问题，另外最好使用推荐的ADVANTAGE 2 POLYMERASE很好使的
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2楼2010-07-14 16:17:03
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该不是要求2K的片段，其实越短应该越好，他的意思可能是不能太长。
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3楼2010-07-14 16:31:17
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xll1107

银虫 (小有名气)
谢谢楼上的2位。
今天在clontech的网站 找到了传说中的smart 升级版，smarter，呵呵，又要再学习说明书了
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4楼2010-07-15 09:17:34
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aqingkl

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
lz我也要做5RACE，BD SMART RACE cDNA Amplification kit这个试剂盒好使吗，价格怎么样
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5楼2012-09-07 20:38:18
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