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cowboy1868

禁虫 (小有名气)
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1楼 2011-03-29 13:56:11
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genomelin

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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-29 19:34:09
处理的时候无论你提的如何，都要用DNase消化处理的，再往下做反转
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2楼2011-03-29 14:54:07
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szylnl

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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流，感谢参与 2011-03-29 15:46:45
RNA有降解，有没有DNA污染， 从胶上看的不准，你可以用一个以前P出结果的引物，以RNA为模板做一下PCR，如果P出来的 则证明没有DNA污染，
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用百分之百的努力去做每件事
3楼2011-03-29 15:15:45
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szylnl

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顺便问一下 你的这个试剂盒是哪个公司的啊？价钱是多少啊
呵呵 谢谢
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4楼2011-03-29 15:20:04
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cowboy1868

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5楼2011-03-29 16:19:18
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szylnl

银虫 (小有名气)
лл
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6楼2011-03-29 16:36:37
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cowboy1868

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7楼2011-03-29 16:48:40
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szylnl

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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-29 19:34:22
我提取是用的OMEGA的试剂盒，5次，135元，后来发现有DNA污染，就又在它那里买了个DNase，是不含有RNase的，酶和buffer 50次 一共425元，效果不错，没有DNA，RNA提的也还可以，3个小时左右，28s是18s的两倍，看不见5s
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8楼2011-03-29 18:34:48
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genomelin

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引用回帖:
Originally posted by szylnl at 2011-03-29 15:15:45:
RNA有降解，有没有DNA污染， 从胶上看的不准，你可以用一个以前P出结果的引物，以RNA为模板做一下PCR，如果P出来的 则证明没有DNA污染，

这个是降解吗？？我记得菌类的就是这样的吧，毕竟是组织，5S很难弄的很干净的
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9楼2011-03-29 20:14:00
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genomelin

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引用回帖:
Originally posted by cowboy1868 at 2011-03-29 16:48:40:
那请问你用的什么牌子的DNase？谢谢

New England
我们一般用Trizol+invitrogen 的kit，在第二次洗脱的时候加DNase
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10楼2011-03-29 20:15:44
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