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【求助/交流】关于SMARTer™ RACE cDNA Amplification 的求助....谢谢...
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cowboy1868
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2011-03-29 13:56:11
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-29 19:34:09
处理的时候无论你提的如何,都要用DNase消化处理的,再往下做反转
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2楼
2011-03-29 14:54:07
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流,感谢参与 2011-03-29 15:46:45
RNA有降解,有没有DNA污染, 从胶上看的不准,你可以用一个以前P出结果的引物,以RNA为模板做一下PCR,如果P出来的 则证明没有DNA污染,
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3楼
2011-03-29 15:15:45
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顺便问一下 你的这个试剂盒是哪个公司的啊?价钱是多少啊
呵呵 谢谢
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4楼
2011-03-29 15:20:04
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5楼
2011-03-29 16:19:18
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2011-03-29 16:36:37
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2011-03-29 16:48:40
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-29 19:34:22
我提取是用的OMEGA的试剂盒,5次,135元,后来发现有DNA污染,就又在它那里买了个DNase,是不含有RNase的,酶和buffer 50次 一共425元,效果不错,没有DNA,RNA提的也还可以,3个小时左右,28s是18s的两倍,看不见5s
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8楼
2011-03-29 18:34:48
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Originally posted by
szylnl
at 2011-03-29 15:15:45:
RNA有降解,有没有DNA污染, 从胶上看的不准,你可以用一个以前P出结果的引物,以RNA为模板做一下PCR,如果P出来的 则证明没有DNA污染,
这个是降解吗??我记得菌类的就是这样的吧,毕竟是组织,5S很难弄的很干净的
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9楼
2011-03-29 20:14:00
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Originally posted by
cowboy1868
at 2011-03-29 16:48:40:
那请问你用的什么牌子的DNase?谢谢
New England
我们一般用Trizol+invitrogen 的kit,在第二次洗脱的时候加DNase
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10楼
2011-03-29 20:15:44
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