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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物酶切
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物酶切 已有6人参与

加保护碱基后用rtaq扩增片段是否会影响酶切效率？因为产物3‘端会多加一个A，相当于3’端多加了一个保护碱基，这会不会影响内切酶的识别效率呢？谢谢各位！
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1楼 2014-07-07 16:59:58
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-07 20:37:18
不会的，放心吧！保护碱基是保证酶切位点两端足够长，更长不会有问题的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-07-07 19:08:22
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泥鳅越钻越深

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-16 15:09:40
不会，保护碱基都有个最低数目，少了会降低效率，多一两个不会影响。
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Decision Is So Important !
3楼2014-07-07 21:46:25
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周兵lofter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
jiaoxiayoulu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:37:20
应该有影响的  http://baike.baidu.com/view/2223436.htm?fr=aladdin  保护碱基与酶切效率   但我感觉影响不大，如果你不想在后面加A，用高保真酶pfu酶试一试。
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乐观向上 积极拼搏 热爱生命 用心生活
4楼2014-07-24 08:44:34
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
jiaoxiayoulu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:37:33
不影响酶切效率，克隆还是用高保真酶。
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5楼2014-07-24 08:55:34
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★
jiaoxiayoulu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:37:44
这要根据具体的内切酶而定，一般需要加数个，如果不加，许多酶无法有效切割。
即便加多了也不会有负面影响。
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6楼2014-07-24 08:58:09
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

不会影响。但是这个酶循环次数不要太多。它不算是个高保真的酶。
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7楼2014-07-24 09:45:28
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