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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

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[求助] 载体构建中质粒酶切问题已有3人参与

构建的pET28a载体，跑胶检测发现酶切后比空载跑的快正常吗？另外切胶后回收用nanodrop检测发现切后的质粒峰不对，260没有最高峰是什么原因造成的，如何解决？

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天道酬勤

1楼 2014-06-29 01:06:31

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三吉草

铜虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-29 15:12:26
gyesang: 回帖置顶 2014-07-15 21:59:54

等你把胶回收完了再取微量样品跑个胶看看，酶切前后有差异就先做试试吧！另外，你的260峰值不好，可能是由于一些酚或醇没除去！比如你的胶回收加水洗脱前酒精没有挥发干净！个人建议你在柱子空转后开盖凉的时间长一点，20-30分钟我都凉过，看你实验安排吧，急着连接就少凉会，祝好运哈！

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