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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

[求助] 载体构建中质粒酶切问题 已有3人参与

构建的pET28a载体,跑胶检测发现酶切后比空载跑的快正常吗?另外切胶后回收用nanodrop检测发现切后的质粒峰不对,260没有最高峰是什么原因造成的,如何解决?

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天道酬勤
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主酶切体系多大啊,胶回收跑电泳没有条带。
踏实
9楼2014-08-29 15:22:27
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查看全部 13 个回答

阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
帮顶~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
4楼2014-06-29 06:24:11
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三吉草

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
随风飘摇11: 金币+2, 嗯哼~好的,我试一试 2014-06-29 08:03:13
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-29 15:12:26
gyesang: 回帖置顶 2014-07-15 21:59:54
等你把胶回收完了再取微量样品跑个胶看看,酶切前后有差异就先做试试吧!另外,你的260峰值不好,可能是由于一些酚或醇没除去!比如你的胶回收加水洗脱前酒精没有挥发干净!个人建议你在柱子空转后开盖凉的时间长一点,20-30分钟我都凉过,看你实验安排吧,急着连接就少凉会,祝好运哈!

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5楼2014-06-29 07:19:44
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fantasy92

木虫 (小有名气)

西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-07-03 12:21:29
是不是因为眼泪掉进去了?
6楼2014-07-02 16:05:29
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