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动力小火车

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
红花: 1
帖子: 17
在线: 11小时
虫号: 2722325
注册: 2013-10-14
专业: 病原真菌、真菌感染与宿主

[求助] 酵母基因组提取已有2人参与

用玻璃珠震荡的方法提取酿酒酵母基因组，可是跑0.7%的DNA胶，1500一下的条带全都是弥散的，请教一下这最可能是哪步出了问题呢？还有就是，我提基因组的目的主要是为了将其作为模板，PCR获得目的片段。所以如果能够进行菌落PCR是最好的。尝试了直接挑取菌落溶于20ul双蒸水中，95度加热20min后取2ul作为模板。可是不行，想请教一下，怎样处理菌落更容易直接进行PCR呢？

酵母基因组提取

20140625.jpg

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1楼2014-06-28 09:27:15

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d00614028

银虫 (小有名气)

应助: 76 (初中生)
金币: 1148.6
红花: 4
帖子: 150
在线: 123.1小时
虫号: 650785
注册: 2008-11-10
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-06-29 17:22:27

菌落PCR的话取0.2%的SDS 30ul于PCR管内，然后挑取单菌落于SDS中，在PCR仪上99度10min，冷却后取1ul（或者2ul）的上清作为模板。

3楼2014-06-29 15:41:54

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