| 查看: 3188 | 回复: 8 | |||
[交流]
酵母 基因组提取问题 已有8人参与
|
| 原则上要求用 玻璃珠进行细胞壁破碎，但是手头没有小颗粒的玻璃珠可以使用，能不能用石英砂来代替啊，有没有人用石英砂来破过酵母细胞壁啊，谢谢回复 |
回复此楼» 猜你喜欢
今天务委会开完了，明天出结果吗
已经有8人回复
-
在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。
已经有7人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有22人回复
-
某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感
已经有9人回复
-
放榜前的不淡定
已经有18人回复
-
什么时候开奖？
已经有13人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有8人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有10人回复
-
人气不行了
已经有11人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有22人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于毕赤酵母表达
已经有22人回复
- 求助一个关于酿酒酵母转化的问题
已经有19人回复
- 酿酒酵母基因组PCR出了16S的条带
已经有8人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 关于酵母的鉴定
已经有7人回复
- 毕赤酵母表达出蛋白但没有活性
已经有18人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- 酵母转化的问题
已经有7人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 酵母质粒转化及提取验证问题求助
已经有12人回复
- 啤酒酵母质粒转化求助
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有20人回复
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11638.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3407
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-08-29 17:12:31
3楼2011-08-29 20:29:00
iaminxanadu
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 16
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1473.3
- 散金: 1300
- 红花: 14
- 帖子: 631
- 在线: 429.6小时
- 虫号: 531438
- 注册: 2008-03-23
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2011-08-30 09:41:29
chenllky2011
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 158.8
- 帖子: 49
- 在线: 45.5小时
- 虫号: 1281561
- 注册: 2011-04-29
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2011-08-30 11:03:26
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- MicEPI: 1
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4706.8
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2319
- 在线: 742.9小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
我用研钵将石英砂研成很小的粉，漩涡可以达到很好的破胞效果。protocol如下： 1. 取1 ml过夜培养的酵母培养液于1.5 ml EP管中，3000 rpm离心1 min，收集菌体； 2. 加入500 ul无菌水洗涤菌体，12000 rpm离心1 min，弃上清； 3. 加入200 ul石英砂悬液（10％ w/v，研磨后的石英砂重悬于PH 8.0 TE溶液）悬浮细胞，200 ul酚/氯仿/异戊醇（v/v 25：24：1），高速漩涡振荡5 min； 4. 12000rpm离心5 min，将水相转移至干净EP管中； 5. 加入1/10体积的5M的NaAc（40 ul），3倍体积的冰无水乙醇（400－500 ul），－20℃沉降1 h； 6. 4 ℃ 12000 rpm离心10min，弃上清； 7. 加入500 ul 70％乙醇洗涤，12000 rpm离心5 min弃上清； 8. 重复洗涤一次； 9. 小心吸干残留液体，37 ℃培养箱干燥5-10 min； 10. 加入25ul双蒸水溶解DNA，加1ul RNase处理30 min,取1 uL电泳检测。 基因组提出来一般般，但做模板问题不大。  [ Last edited by susizheng on 2011-8-30 at 17:08 ] |
6楼2011-08-30 17:00:01
7楼2011-08-31 14:21:14
learningying
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 5431.9
- 散金: 323
- 红花: 34
- 帖子: 1075
- 在线: 256.9小时
- 虫号: 2055341
- 注册: 2012-10-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2014-11-06 16:14:04
9楼2015-04-21 17:39:38
20