应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 去除基因组DNA的原理是什么？具体点！
51/1返回列表
查看: 3973  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

创造翅膀zcj

新虫 (初入文坛)

[求助] 去除基因组DNA的原理是什么？具体点！ 已有4人参与

去除基因组DNA的原理是什么？具体点！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-09 18:40:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是在问RNA提取过程中去除基因组的原理吗？
基因组可能会干扰RT PCR的结果（如果你设计的引物不跨外显子），所以要去除。
一般都是用DNase去除，这种酶只切割双链的DNA，不会影响RNA。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-09 22:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问的是什么实验过程呢？具体点。

质粒提取？RNA提取？蛋白提取？
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-09 23:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据中心法则，RNA是由DNA的外显子部分转录而来，所以提RNA反转录成cDNA后再扩增目的片段，是不会把内含子扩进去的。如果你不除基因组DNA，扩增结果很难保证没有内含子，而目的片段中内含子的存在会极大的影响后续实验
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-10 08:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果你说的是RNA提取过程

在加入氯仿吸取上清那一步的时候，RNA在上层水相里，而DNA是在中间的酚-氯仿层相里了，然后抛弃了，所以基因组就不再你提取的RNA里了
当然，你接下来最好加入dnase，这样可以尽可能的消除残余的基因组

如果是对实验的影响，楼上讲的很透彻

就是rna翻转成CDNA来做实验，而cdna如果混在了DNA的话，会影响实验结果
赞一下 回复此楼
天行健
5楼2014-06-10 09:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 创造翅膀zcj 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭