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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一个基因 要做定点突变 方法通过同源重组宿主基因组上基因置换
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lgluo

新虫 (初入文坛)

[求助] 一个基因 要做定点突变 方法通过同源重组宿主基因组上基因置换

对基因组上一基因进行定点突变，用同源重组替换原有的基因，要怎么设计？单交换和双交换也不是很清楚
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1楼 2013-11-16 09:39:37
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merrybee

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lgluo: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-18 20:56:29
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 19:43:21
本帖内容被屏蔽
2楼2013-11-17 10:45:58
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merrybee

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2013-12-12 18:00:23
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lgluo

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by merrybee at 2013-12-12 18:00:23
你先说你做的什么生物，目前用什么方法进行基因敲除吧，这样我才能具体跟你说说

做放线菌的
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4楼2013-12-13 21:07:51
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merrybee

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-12-14 23:17:06
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lgluo

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by merrybee at 2013-12-14 23:17:06
没我做过放线菌，先请问你一下放线菌目前有没有成熟的敲除体系（最后不带抗生素标记-Markerless deletion;或者是无痕敲除-scarless deletion）？我觉得应该是存在的，有的话你给我看看，就知道怎么做了...

有通过同源重组进行基因进行敲除，还有位点特异性重组如Cre/loxp、Flp/FRT等，这些要具有重组酶识别的位点，位点特异性重组最后不带抗生素标记
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6楼2013-12-16 18:50:23
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