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nlbtr

铜虫 (小有名气)


[交流] 将目的基因整合到哺乳动物细胞基因组上的方法有哪些?随机or定点?

各位虫友,最近在了解基因整合方面的知识和信息。非常想了解,目前将目的基因整合到哺乳动物细胞基因组中的方法主要有哪些?

每种方法是随机整合还是定点整合?优缺点如何?

[ Last edited by nlbtr on 2013-1-18 at 12:23 ]
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千古龙飞地

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也想知道。。。帮顶看转染的情况,是随机的整合吧。。
2楼2013-01-19 10:00:09
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Mingn1

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-20 09:48:51
现在还不能将外来基因定点整合到基因组上,都是随机的整合的!不过国外有定点整合这方面的研究,还没成功。
4楼2013-01-19 11:00:22
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丽羽寒梅

铁虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
nlbtr: 金币+1, 谢谢,国外有什么技术能够实现定点整合呢? 2013-01-20 11:34:18
整合的方法是随机的,选择国内的技术还不能实现定点整合
5楼2013-01-19 20:15:57
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diatant

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与,不过1994年的文献实在有点老 2013-01-20 09:48:40
nlbtr: 金币+1, 看了下abstract,讲的是定点敲除哦,非定点整合呢。 2013-01-20 11:33:46
Gu, H., et al. 1994. Deletion of a DNA polymerase beta gene segment in T cells using cell type-specific gene targeting. Science 265:103–106
6楼2013-01-19 21:52:18
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wangweicheng

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
 一.磷酸钙转染技术

四 .基因显微注射技术
7楼2013-01-20 15:34:26
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nlbtr

铜虫 (小有名气)


???????:
7?: Originally posted by wangweicheng at 2013-01-20 15:34:26
 一.磷酸钙转染技术

四 .基因显微注射技术

 一.磷酸钙转染技?�

?� .基因显微注射技?�

??????????????????
8楼2013-01-21 08:58:27
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diatant

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by diatant at 2013-01-19 21:52:18
Gu, H., et al. 1994. Deletion of a DNA polymerase beta gene segment in T cells using cell type-specific gene targeting. Science 265:103–106

额 我好想确实搞错意思了
应该有跟转位子相关的方法吧 转位子两端的对称序列可以帮助引导
9楼2013-01-21 11:26:21
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百奥赛图沈博

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是用细胞系的话,通常线状化质粒转染会得到随机整合。现在可以通过Talen技术, 将染色体特定位置打开一个缺口,再通过同源重组的方式实现定点整合。其实也不是很难做。
10楼2013-01-22 19:03:54
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nlbtr

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by 百奥赛图沈博 at 2013-01-22 19:03:54
如果是用细胞系的话,通常线状化质粒转染会得到随机整合。现在可以通过Talen技术, 将染色体特定位置打开一个缺口,再通过同源重组的方式实现定点整合。其实也不是很难做。

TALEN的话,好像比较容易脱靶,同时筛选比较难吧。
11楼2013-01-28 17:07:15
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简单回复
2013-01-19 10:23   回复  
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