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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 将目的基因整合到哺乳动物细胞基因组上的方法有哪些？随机or定点？
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nlbtr

铜虫 (小有名气)

[交流] 将目的基因整合到哺乳动物细胞基因组上的方法有哪些？随机or定点？

各位虫友，最近在了解基因整合方面的知识和信息。非常想了解，目前将目的基因整合到哺乳动物细胞基因组中的方法主要有哪些？

每种方法是随机整合还是定点整合？优缺点如何？

[ Last edited by nlbtr on 2013-1-18 at 12:23 ]
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1楼 2013-01-18 12:21:49
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千古龙飞地

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也想知道。。。帮顶看转染的情况，是随机的整合吧。。
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2楼2013-01-19 10:00:09
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Mingn1

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-20 09:48:51
现在还不能将外来基因定点整合到基因组上，都是随机的整合的！不过国外有定点整合这方面的研究，还没成功。
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4楼2013-01-19 11:00:22
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丽羽寒梅

铁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
nlbtr: 金币+1, 谢谢，国外有什么技术能够实现定点整合呢？ 2013-01-20 11:34:18
整合的方法是随机的，选择国内的技术还不能实现定点整合
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5楼2013-01-19 20:15:57
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diatant

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与，不过1994年的文献实在有点老 2013-01-20 09:48:40
nlbtr: 金币+1, 看了下abstract，讲的是定点敲除哦，非定点整合呢。 2013-01-20 11:33:46
Gu, H., et al. 1994. Deletion of a DNA polymerase beta gene segment in T cells using cell type-specific gene targeting. Science 265:103–106
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6楼2013-01-19 21:52:18
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wangweicheng

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
　一.磷酸钙转染技术

四 .基因显微注射技术
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7楼2013-01-20 15:34:26
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nlbtr

铜虫 (小有名气)
???????:
7?: Originally posted by wangweicheng at 2013-01-20 15:34:26
　一.磷酸钙转染技术

四 .基因显微注射技术

　一.磷酸钙转染技?�

?� .基因显微注射技?�

??????????????????
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8楼2013-01-21 08:58:27
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diatant

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by diatant at 2013-01-19 21:52:18
Gu, H., et al. 1994. Deletion of a DNA polymerase beta gene segment in T cells using cell type-specific gene targeting. Science 265:103–106

额 我好想确实搞错意思了
应该有跟转位子相关的方法吧 转位子两端的对称序列可以帮助引导
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9楼2013-01-21 11:26:21
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百奥赛图沈博

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是用细胞系的话，通常线状化质粒转染会得到随机整合。现在可以通过Talen技术, 将染色体特定位置打开一个缺口，再通过同源重组的方式实现定点整合。其实也不是很难做。
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10楼2013-01-22 19:03:54
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nlbtr

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 百奥赛图沈博 at 2013-01-22 19:03:54
如果是用细胞系的话，通常线状化质粒转染会得到随机整合。现在可以通过Talen技术, 将染色体特定位置打开一个缺口，再通过同源重组的方式实现定点整合。其实也不是很难做。

TALEN的话，好像比较容易脱靶，同时筛选比较难吧。
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11楼2013-01-28 17:07:15
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11929290383楼
2013-01-19 10:23   回复  
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