24小时热门版块排行榜    

查看: 1076  |  回复: 5

adslye

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教基因组的纯化方法。 已有3人参与

提了基因组,准备做walking。
纯化是用的酚氯仿抽提,然后醇沉。
但提纯有一步用到糖原。
最后析出DNA的配方是:95醇,醋酸钠,糖原。
虽然糖原有助于DNA的沉淀,我想没有应该也没问题。
你们认为呢?

另外,请问各位还知道什么纯化基因组的方法吗?

[ Last edited by adslye on 2010-8-8 at 17:09 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):最近很积极~~ 2010-08-08 21:38:01
没加过糖原 。。。。就是用1/10体积的醋酸钠  跟 2倍体积的无水乙醇
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-08-08 18:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

哦,我查了,不加的确可以。
不过加了效果更好,sigma有专门的糖原,500ul,250RMB
还挺贵的。可以用500次。
多谢啊,不过你还有什么别的纯化DNA的方法吗?
3楼2010-08-08 19:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):热心的ben~ 2010-08-08 21:37:41
糖原作为核酸沉淀的担体,有利于提高沉淀效率。但是如果你的样品量不是太小的话,基因组DNA一般不需要外加糖原促进沉淀,1/10体积的3M醋酸钠和大于2倍体积(推荐2.5倍)的乙醇足以沉淀DNA
4楼2010-08-08 21:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-08-08 21:20:19:
糖原作为核酸沉淀的担体,有利于提高沉淀效率。但是如果你的样品量不是太小的话,基因组DNA一般不需要外加糖原促进沉淀,1/10体积的3M醋酸钠和大于2倍体积(推荐2.5倍)的乙醇足以沉淀DNA

哦,明白了!多谢。我可以用异丙醇来沉淀吗?用异丙醇是不是沉淀效率要高于乙醇,这样也就可以弥补我不用糖原的地方了?

多谢~~
5楼2010-08-08 21:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)


lstt09nk(金币+1):欢迎交流~~ 2010-08-08 21:48:18
引用回帖:
Originally posted by adslye at 2010-08-08 21:29:42:


哦,明白了!多谢。我可以用异丙醇来沉淀吗?用异丙醇是不是沉淀效率要高于乙醇,这样也就可以弥补我不用糖原的地方了?

多谢~~

异丙醇的好处是用量小
比如说在1.5的管里面,如果DNA溶液多于500ul就没法用乙醇沉淀了,装不下两倍体积,用异丙醇就可以

但是说到沉淀效率,我感觉还是乙醇好一点,经常用异丙醇沉不出来东西,搞得很郁闷。而且异丙醇也不好闻
6楼2010-08-08 21:47:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 adslye 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +9 小楼。 2026-03-12 13/650 2026-03-16 15:08 by 加号+
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
请填处理意见