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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 基因组DNA提取时多糖的去除
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我是驴

金虫 (小有名气)

[求助] 基因组DNA提取时多糖的去除已有1人参与

求教各位，在提取微生物基因组DNA时如何去除多糖杂质？我已经采用了CTAB法，但是多糖还是很多，粗提DNA中有无色胶状物质存在。
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努力向前
1楼2012-04-26 19:44:29
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ben1147

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-27 08:51:04
CTAB+PVP
实在不行可以试试30%的乙醇沉淀多糖
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3楼2012-04-26 20:13:46
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进步一点点

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般微生物不应该有那么多的多糖杂质吧？不会是带有荚膜的微生物？或是能积累多糖的微生物？不然怎么会有胶状杂质出现？不妨前处理微生物，酸或是酶除去多糖杂质，再提dna。仔细分析一下啊！
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科研穷三代，读博毁一生
5楼2012-04-28 00:13:37
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songxc123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你要提取的微生物是不是产胞外多糖啊，所以才那么多多糖存在。
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6楼2012-04-28 08:27:47
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lhwen182

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接用酚氯仿、异戊醇反复抽提几次，效果还好的。
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7楼2012-04-28 09:53:50
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普通回帖

喜马拉雅山

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-27 08:50:57
加入6.5%的PVP-40和1.5%的CTAB，然后酚：氯仿：异戊醇=25：24：1反复几次，可以试试哈！！据说效果不错哦
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2楼2012-04-26 20:05:42
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qwz

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
自己查一下资料，多糖去除，用络合沉淀，效果不错，并且一定非常彻底。资料很多，现成的，也不复杂
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4楼2012-04-28 00:08:06
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fgd2009

铁虫 (初入文坛)
我也碰到了类似的情况，目前也不知道怎么解决了，用30%的乙醇沉淀也不行。
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8楼2012-08-24 08:56:29
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christll

新虫 (初入文坛)
  我也遇到形同问题了  想了各种办法都不行  大量胶体导致DNA都提取不出来   楼主解决了不   求分享啊
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9楼2013-05-04 21:57:59
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wangliually

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 喜马拉雅山 at 2012-04-26 20:05:42
加入6.5%的PVP-40和1.5%的CTAB，然后酚：氯仿：异戊醇=25：24：1反复几次，可以试试哈！！据说效果不错哦

不知虫友是否用过这种方法？或者有参考文献可以推荐下吗
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10楼2013-10-22 18:18:54
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