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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 染色体PCR无法P出目的基因
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xyq145058

新虫 (初入文坛)

[求助] 染色体PCR无法P出目的基因 已有1人参与

正确提取的细菌的染色体，taq酶用的KOD puls neo和QUICK taq，都P不出东西，是不是引物的问题，求大神指教。另外，两个引物的5’端都要加一段酶切位点，分别是ECO R1和SAL1，但不是染色体模板的互谱序列，这样对PCR是否有影响？上下引物的tm值都是51℃左右，PCR条件是按说明书来的。是不是还要加保护碱基？
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1楼 2014-06-23 10:07:19
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-23 17:28:40
引物的Tm值太低了，酶切位点不影响PCR效果，可能的原因是引物不好
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rainwater
2楼2014-06-23 16:49:07
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