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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 目的蛋白的编码基因的调取
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wang23212

银虫 (小有名气)

[求助] 目的蛋白的编码基因的调取已有1人参与

我们现在发现同时发现一个蛋白发生了改变
怀疑细胞发生了某种突变
想要调取这个蛋白的编码基因
该怎么做？
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1楼2014-05-06 19:12:06
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做个BLAST不是就可以知道是哪个基因了吗？
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2楼2014-05-06 21:45:03
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wang23212

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-05-06 21:45:03
做个BLAST不是就可以知道是哪个基因了吗？

但是蛋白编码基因的变化还是不知道啊
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3楼2014-05-08 13:11:32
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wang23212 at 2014-05-08 13:11:32
但是蛋白编码基因的变化还是不知道啊...

blast找到目的基因在染色体的位置，然后从两端设计引物做PCR，再拿PCR产物测序。PCR可能有一定几率的突变，要用高保真的酶，还有多次两次。
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4楼2014-05-08 17:26:34
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wang23212

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuderong at 2014-05-08 17:26:34
blast找到目的基因在染色体的位置，然后从两端设计引物做PCR，再拿PCR产物测序。PCR可能有一定几率的突变，要用高保真的酶，还有多次两次。...

测序不是测得是大量的么  如果只有少量细胞突变  RTPCR提取cDNA在PCR送测序不也是测出普通细胞的么
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5楼2014-05-10 09:29:35
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