应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】如何调取未知基因
81/1返回列表
查看: 1477  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何调取未知基因

我有个真菌类微生物，想做基因敲除，但是没有该菌株的基因序列，只是推测有相关途径（该途径在蓝细菌里存在），想问一下大家，如何克隆出这段未知基因？非常焦急！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-23 20:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengfan1109

银虫 (正式写手)
huangdi07(金币+1): 2011-03-23 22:37:18
既然有了可能相关的序列，那可以先根据已经有的序列设计引物，尝试调出基因，再测序。
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-23 22:26:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhengfan1109 at 2011-03-23 22:26:26:
既然有了可能相关的序列，那可以先根据已经有的序列设计引物，尝试调出基因，再测序。

现在的情况是，只有蓝细菌里有这段序列，真菌属于真核生物，是不是设计引物时考虑密码子简并性问题啊？另外，做race能实现吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-23 22:39:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
huangdi07(金币+1): 2011-03-24 08:05:26
不知道序列，知道功能的话也可以
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-23 22:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gongeleven at 2011-03-23 22:40:59:
不知道序列，知道功能的话也可以

如何设计引物啊？两个菌一个真核的一个原核的，差异很大啊
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-24 08:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-03-24 12:49:39
huangdi07(金币+1): 谢谢 2011-03-25 11:17:40
可以参考一下蓝细菌的基因序列
做一短点的引物然后做一下BLAST验证后优化引物做一下PCR试试了
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-03-24 10:33:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunwei57

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白的活性中心是保守的,寻找该蛋白的保守序列设计兼并引物
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-18 21:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用先搜索est做电子克隆，然后设计兼并引物或高同源区域设计引物啊。其实这就是最基本的同源克隆，搜索下很多的，书上也有相关知识。
赞一下 回复此楼
8楼2012-03-18 22:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huangdi07 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭