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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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scncwxy

木虫 (著名写手)

[求助] 基因体内转染如何做到无菌 已有1人参与

自己抽提的质粒，合成的载体材料，混合后粒径大概在200～250nm，过0.22滤膜会有很大的损失，还有什么办法吗？
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1楼 2011-12-09 22:25:01
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-11 18:09:53
你可以大致估计你载体的转染持续时间，过了就换用含抗生素的培养基
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2楼2011-12-10 15:26:13
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): Good！ 2011-12-11 18:10:08
自己准备的质粒反复冻融两三次就没问题了（如果要求更高，可以考虑再用异丙醇沉淀，70%酒精漂洗，超净台操作等方法），关键是你自己合成的载体材料，在和质粒混合前需要去菌操作，可以考虑过滤或其他合适你的材料的方法（钴照射等）
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3楼2011-12-11 10:29:27
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scncwxy

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by panda73 at 2011-12-11 10:29:27:
自己准备的质粒反复冻融两三次就没问题了（如果要求更高，可以考虑再用异丙醇沉淀，70%酒精漂洗，超净台操作等方法），关键是你自己合成的载体材料，在和质粒混合前需要去菌操作，可以考虑过滤或其他合适你的材料 ...

反复冻融会损伤DNA吗？直接用蒸馏水可以吗
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4楼2011-12-11 10:55:44
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ddtao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-12-13 21:33:18
过0.22滤膜会有很大的损失,应该无菌操作
能否建议您用
9Arg-4His-9Arg-4His-5cystine-4His-9Arg-4His-9Arg   ？
国内已有生产
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5楼2014-12-13 16:09:34
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