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qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑出来的条带有拖带是什么原因 已有1人参与

请大神指点下 这是根据自己设计的引物跑出来的,目的片段大小是500,好像有就是拖带比较严重

PCR后跑出来的条带有拖带是什么原因
lenovo 2014-06-18 17 时 10 分.jpg
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qaz139687(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:31:11
1 不是拖尾严重,500bp根本没有条带的,最下面的是引物二聚体
2 退火温度没有找好
3 建议你依照引物合成单做,未出来 就做一个touch down PCR
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-19 12:39:54
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qaz139687

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-19 12:39:54
1 不是拖尾严重,500bp根本没有条带的,最下面的是引物二聚体
2 退火温度没有找好
3 建议你依照引物合成单做,未出来 就做一个touch down PCR

退火温度用引物单上的不用PRIME5 给你的那个温度吗
3楼2014-06-19 13:13:34
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by qaz139687 at 2014-06-19 13:13:34
退火温度用引物单上的不用PRIME5 给你的那个温度吗...

都要参考的,引物单子也不是百分之百适合你的试验
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-19 13:15:01
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小张同志

新虫 (初入文坛)

500bp压根没条带,何来拖尾?
5楼2014-06-19 15:13:54
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qaz139687

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小张同志 at 2014-06-19 15:13:54
500bp压根没条带,何来拖尾?

那这种现象是什么原因呢
6楼2014-06-19 15:17:06
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

引物二具体吧,这个是
7楼2014-06-20 07:26:51
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menglongpai

新虫 (初入文坛)

会不会是引物没有设计好,形成了二聚体
8楼2015-03-26 19:14:12
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