| 查看: 2496 | 回复: 8 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
sarah-miao银虫 (正式写手)
|
[求助]
高GC模板含量的PCR扩增？ 已有1人参与
|
|||
| 请教大家高GC模板含量的扩增？如何扩增，有哪家的酶比较好用，PCR过程中需要注意些什么事项，还望各位赐教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有145人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 高GC模版扩增不出条带，求PCR高手
已经有5人回复
- 模版GC含量高，二级结构复杂，PCR扩不出来
已经有5人回复
- 关于PCR 扩增 引物可以扩增多长的模板
已经有4人回复
- 大片段PCR扩增求助
已经有23人回复
- 如何扩增GC含量较高的片段
已经有7人回复
- PCR重复不出来
已经有7人回复
- PCR引物GC含量过低时候，如何调整PCR体系？
已经有6人回复
- 进行点突变的pcr，不能扩增出产物
已经有3人回复
- 无模板pcr合成短片段 一直失败
已经有44人回复
- PCR回收产物做PCR模板，为什么扩不出来
已经有8人回复
- PCR产物继续扩增原来的片段效果会更好吗？
已经有16人回复
- 关于GC含量高的模板
已经有12人回复
- 高GC含量基因片段PCR问题
已经有13人回复
- GC含量测定相关问题，请教大家一下！！！
已经有5人回复
- 16srDNA PCR扩增问题，帮忙分析下原因
已经有4人回复
- PCR扩增出现的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】高GC含量的模板，请问多少含量就算高呢？
已经有10人回复
- 【求助/交流】求富含GC的片段的PCR条件
已经有10人回复
- 【求助/交流】模板浓度对PCR的影响
已经有4人回复
- 【求助/交流】PCR扩增模板精确定量:两个拷贝or三个拷贝的试验方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】PCR中加入模板的量有什么要求？
已经有6人回复
- 【求助/交流】pcr中模板量的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】低GC含量的模板设计引物
已经有7人回复
sarah-miao
银虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 184.6
- 散金: 116
- 红花: 2
- 帖子: 753
- 在线: 154.4小时
- 虫号: 1462411
- 注册: 2011-10-26
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2014-06-19 08:01:49
飞约疯人院
专家顾问 (著名写手)
科学怪人
-
专家经验: +140 - MolEPI: 2
- 应助: 308 (大学生)
- 金币: 1079.5
- 散金: 8294
- 红花: 65
- 沙发: 5
- 帖子: 1996
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 3188421
- 注册: 2014-05-07
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-06-18 22:13:55
sarah-miao: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-06-19 08:01:58
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-06-18 22:13:55
sarah-miao: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-06-19 08:01:58
|
1 建议用生工的：高GC含量模板PCR扩增试剂盒： 2 原因如下： PCR反应中有时由于引物或模板中GC含量过高导致双链变性及引物与模板退火困难，并且普通Taq DNAPolymerase在98℃的时候很容易就失活，从而导致PCR失败。生工针对高GC含量和复杂二级结构的模板设计的PCR buffer及HotTaq DNAPolymerase可增强反应的特异性及稳定性，从而获得好的实验结果。 3 影响因素： 影响PCR反应的因素很多，如果发现PCR反应没有得到所需产物或条带较弱，建议用试剂盒中提供的25mmol/L MgCl2调节反应体系中的Mg2+浓度，以期获得更好的结果。 |
2楼2014-06-18 20:03:27
4楼2014-06-23 09:25:59
sarah-miao
银虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 184.6
- 散金: 116
- 红花: 2
- 帖子: 753
- 在线: 154.4小时
- 虫号: 1462411
- 注册: 2011-10-26
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
5楼2014-06-24 12:33:54
50