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关于GC含量高的模板
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各位大侠，请求帮助~~ 1.我的基因组是链霉菌，GC含量很高，有没有哪家测这方面比较靠谱的测序公司推荐一个呀？ 2.之前测序了几个基因，但是都发现了同一个问题，比如送了一个基因的两个克隆子（菌液，即平行样）但是这两个的测序结果碱基竟然有7~8个不一样，是用EX TAQ做的，而且片段才将近1K，之前做克隆时都没发现这样的情况。请问这是什么问题呢？ 小妹囊中羞涩，悬赏较少，还望各位大侠帮帮可怜的路人吧~~  |
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 【分子生物】EPI帖 |
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yabxxh
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
mengfei8336(MolEPI+1): 谢谢参与。 2011-12-15 09:26:03
baby0032(金币+1): 2011-12-16 11:13:54
mengfei8336(MolEPI+1): 谢谢参与。 2011-12-15 09:26:03
baby0032(金币+1): 2011-12-16 11:13:54
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呵呵，我刚做完了一个基因，GC含量片段前端局部高达87%，片段长3kb。Taq酶我也是一路涌过来的。不要用EXTAQ，也不要用LA TAQ，Prime Star with GC Buffer才是王道。ExTaq我没用过，因为它根本不入我的法眼，Lataq With GC buffer我前期一直用，效果不咋地，根本得不到片段，现在还有几管新的躺在我的冰箱。当然了，我的片段比较长，可能你的1KB能搞定也说不定。不过带gc buffer 的lataq和primestar价格方面来说，prime star才贵了50，我们为什么不一步到位直接用primestar呢。 希望对你有点帮助，好运 |
8楼2011-12-15 09:13:55
blackrose8089
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2楼2011-12-13 18:49:53
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blackrose8089
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4楼2011-12-14 12:31:46
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7楼2011-12-15 08:20:54
blackrose8089
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程序稍有变化，楼主可以试一下，曾经用这个扩出过7.3k的片段，无碱基错误. 9楼2011-12-15 09:54:56
10楼2011-12-15 10:36:10
20