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baby0032

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于GC含量高的模板

各位大侠,请求帮助~~
1.我的基因组是链霉菌,GC含量很高,有没有哪家测这方面比较靠谱的测序公司推荐一个呀?
2.之前测序了几个基因,但是都发现了同一个问题,比如送了一个基因的两个克隆子(菌液,即平行样)但是这两个的测序结果碱基竟然有7~8个不一样,是用EX TAQ做的,而且片段才将近1K,之前做克隆时都没发现这样的情况。请问这是什么问题呢?
小妹囊中羞涩,悬赏较少,还望各位大侠帮帮可怜的路人吧~~
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shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西瓜(金币+2): Good! 2011-12-16 12:08:57
LA 突变率在一两千没问题,多挑几个克隆。但是如果是高GC 而且复杂模板结构,串连重复,连续多个相同碱基,那它的突变频率高的让人无法接受。毕竟它不是保真酶,无法校正,因此换有校正活性的酶才是正道
7楼2011-12-15 08:20:54
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