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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR中加入模板的量有什么要求? 已有6人参与

PCR中加入模板的量有什么要求?
要是说加入的 量是小于1微克,怎么控制量?该加多少微升?
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木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-18 18:16:35
pg-ug级别都可以的,要求不是很严格,
2楼2010-05-18 18:15:33
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wz-louis

银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们做PCR的DNA浓度为5ng/ul,加3ul
笑面人生
3楼2010-05-18 18:46:18
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christina1213

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-18 22:25:22
大部分都是凭感觉,如果有必要可以测下浓度。不过一般的PCR扩几回,就大概知道加多少合适。PCR没有很严格的定量关系,根据实验可以在一定程度上优化下,使之适合自己的材料
4楼2010-05-18 18:51:10
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hyde0706

木虫 (正式写手)

PCR的模板一般要求是10-100ng,最低,高于这个量一般都没有问题。模板量太多会对扩增有一定的抑制作用。
5楼2010-05-18 20:35:41
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虫虫博士

新虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没有严格要求,我一般是过量的,提个2CM叶片,200微升水溶解后,DNA模板加一微升,也不定量。
6楼2010-05-18 21:07:18
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cqyniu

金虫 (小有名气)

没有严格的要求,除非加的量很大,会得不到产物的,一般一微升足够了
7楼2010-05-18 21:14:11
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