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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR中加入模板的量有什么要求？
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR中加入模板的量有什么要求？已有6人参与

PCR中加入模板的量有什么要求？
要是说加入的 量是小于1微克，怎么控制量？该加多少微升？
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1楼2010-05-18 16:34:07
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695

木虫 (职业作家)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-18 18:16:35
pg-ug级别都可以的,要求不是很严格,
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2楼2010-05-18 18:15:33
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wz-louis

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们做PCR的DNA浓度为5ng/ul，加3ul
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笑面人生
3楼2010-05-18 18:46:18
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christina1213

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:25:22
大部分都是凭感觉，如果有必要可以测下浓度。不过一般的PCR扩几回，就大概知道加多少合适。PCR没有很严格的定量关系，根据实验可以在一定程度上优化下，使之适合自己的材料
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4楼2010-05-18 18:51:10
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hyde0706

木虫 (正式写手)
PCR的模板一般要求是10-100ng，最低，高于这个量一般都没有问题。模板量太多会对扩增有一定的抑制作用。
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5楼2010-05-18 20:35:41
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虫虫博士

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有严格要求，我一般是过量的，提个2CM叶片，200微升水溶解后，DNA模板加一微升，也不定量。
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6楼2010-05-18 21:07:18
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cqyniu

金虫 (小有名气)
没有严格的要求，除非加的量很大，会得不到产物的，一般一微升足够了
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7楼2010-05-18 21:14:11
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