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mouse_耗子铁虫 (初入文坛)
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植物总RNA粗提之后能直接用DNA酶去除杂质吗? 已有3人参与
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我们实验室常用的方法是异硫氰酸胍的方法,使用RNA变性裂解液以后,直接两次氯仿抽提,之后加NaAc, 异丙醇沉淀, 乙醇洗涤后吹干,再溶,再用DNA消化去DNA,然后再用酚仿,氯仿抽提,最后沉淀出干净的RNA。感觉比较繁琐,而且时间很长! 请教各位大神,能不能将这之间的粗提之后的沉淀溶解步骤去掉,直接用DNA酶消化之后往后提取? 不知道前面的裂解液对酶的活性有没有影响?裂解液里面有 柠檬酸钠,十二烷基硫酸钠, 异硫氰酸胍,PVP 和β-巯基乙醇等物质,在氯仿抽提的过程中,这些物质是不是还存在于水相当中? 谢各路大神~! |
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Neo2000
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2楼2014-06-12 11:09:11
mouse_耗子
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