24小时热门版块排行榜    

查看: 1514  |  回复: 5

mouse_耗子

铁虫 (初入文坛)

[求助] 植物总RNA粗提之后能直接用DNA酶去除杂质吗? 已有3人参与

我们实验室常用的方法是异硫氰酸胍的方法,使用RNA变性裂解液以后,直接两次氯仿抽提,之后加NaAc, 异丙醇沉淀,
乙醇洗涤后吹干,再溶,再用DNA消化去DNA,然后再用酚仿,氯仿抽提,最后沉淀出干净的RNA。感觉比较繁琐,而且时间很长!
请教各位大神,能不能将这之间的粗提之后的沉淀溶解步骤去掉,直接用DNA酶消化之后往后提取?
不知道前面的裂解液对酶的活性有没有影响?裂解液里面有 柠檬酸钠,十二烷基硫酸钠, 异硫氰酸胍,PVP 和β-巯基乙醇等物质,在氯仿抽提的过程中,这些物质是不是还存在于水相当中?
谢各路大神~!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

时间总是能够挤出来的~!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-12 12:59:25
那你要冒很大的风险哦,抽干净了再除比较好

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-12 11:09:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mouse_耗子

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-12 11:09:11
那你要冒很大的风险哦,抽干净了再除比较好

就是说粗体的液相还是对酶解有影响的?
时间总是能够挤出来的~!
3楼2014-06-12 11:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2020-10-13 11:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

当然可以,很多商品化试剂都是这么做的,柱上消化和磁珠上消化比比皆是。沉淀消化的话,要用DNase和DNase Buffer重悬,消化完加乙醇和盐沉淀
核酸提取与Taqman诊断
5楼2020-10-14 08:25:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

我去,老帖子被翻出来的啊
核酸提取与Taqman诊断
6楼2020-10-14 08:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mouse_耗子 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学308分求调剂 +5 你好明天你好 2026-03-23 6/300 2026-03-23 11:02 by 素颜倾城1988
[考研] 284求调剂 +6 Zhao anqi 2026-03-22 6/300 2026-03-23 09:23 by king123!
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见