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mouse_耗子铁虫 (初入文坛)
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[求助]
植物总RNA粗提之后能直接用DNA酶去除杂质吗？ 已有3人参与
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我们实验室常用的方法是异硫氰酸胍的方法，使用RNA变性裂解液以后，直接两次氯仿抽提，之后加NaAc, 异丙醇沉淀, 乙醇洗涤后吹干，再溶，再用DNA消化去DNA，然后再用酚仿，氯仿抽提，最后沉淀出干净的RNA。感觉比较繁琐，而且时间很长！ 请教各位大神，能不能将这之间的粗提之后的沉淀溶解步骤去掉，直接用DNA酶消化之后往后提取？ 不知道前面的裂解液对酶的活性有没有影响？裂解液里面有 柠檬酸钠，十二烷基硫酸钠， 异硫氰酸胍，PVP 和β-巯基乙醇等物质，在氯仿抽提的过程中，这些物质是不是还存在于水相当中？ 谢各路大神~！ |
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5楼2020-10-14 08:25:49
Neo2000
木虫 (著名写手)
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2楼2014-06-12 11:09:11
mouse_耗子
铁虫 (初入文坛)
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