24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 10846  |  回复: 8

眼泪笑了23

新虫 (小有名气)

[求助] 请问在提RNA的时候,用氯仿:异戊醇=24:1,还是用氯仿? 已有4人参与

请问各位高手,在提取RNA的时候,是可以使用氯仿:异戊醇=24:1,还是可以使用氯仿?
二者有什么区别呢?加氯仿的那一步,可以剧烈震荡吗?有人说剧烈震荡回造成DNA污染?
现在室温有点高,操作在冰上进行?

请各位高手指点一二
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-12 13:00:33
我从来不用异戊醇,那玩意味道太重太难闻,也没必要加的,至于后面那个问题,纯属个人见解,没参考意义。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-11 18:37:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-12 13:00:36
异戊醇的作用是调整极性,使氯仿更高效的萃取酚等有机物以及令蛋白质变性。
关于振荡的问题:如果你采用的是TRIzol一步法,剧烈振荡的确有可能使部分DNA碎片进入水相。如果是分步除杂,问题不大。
低温操作主要是为了降低RNA酶的活性,为了RNA的完整性,尽量低温操作。
3楼2014-06-12 00:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-12 13:00:39
本帖仅楼主可见
4楼2014-06-12 09:58:26
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
眼泪笑了23(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-06 09:23:23
苯酚,氯仿,异戊醇。25:24:1是剧烈震荡,提的RNA还好啊,提RNA 没有专用的RNA台子吗,提RNA最怕污染,RNA酶到处都是啊,再说房间有空调啊,楼主加油啊
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
5楼2014-06-12 17:25:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 夏至1990 at 2014-06-12 17:25:08
苯酚,氯仿,异戊醇。25:24:1是剧烈震荡,提的RNA还好啊,提RNA 没有专用的RNA台子吗,提RNA最怕污染,RNA酶到处都是啊,再说房间有空调啊,楼主加油啊

在刚开始提取的时候是加氯仿,最后进行消化的时候是加上面的苯酚,氯仿,异戊醇,说错了,难道提取的方法不大一样,楼主提取什么的RNA
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
6楼2014-06-12 17:27:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzq6098273

金虫 (小有名气)

你好,TRIzol法提RNA是加酚:氯仿:异戊醇=25:24:1(ph<5.0)好呢?还是氯仿:异戊醇=24:1,PH有要求吗?
天外飞仙
7楼2014-08-05 14:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzq6098273

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangyue115 at 2014-06-12 00:10:23
异戊醇的作用是调整极性,使氯仿更高效的萃取酚等有机物以及令蛋白质变性。
关于振荡的问题:如果你采用的是TRIzol一步法,剧烈振荡的确有可能使部分DNA碎片进入水相。如果是分步除杂,问题不大。
低温操作主要是 ...

你好,TRIzol法提RNA是加酚:氯仿:异戊醇=25:24:1(ph<5.0)好呢?还是氯仿:异戊醇=24:1,PH有要求吗?非常感谢。
天外飞仙
8楼2014-08-05 15:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

引用回帖:
8楼: Originally posted by yzq6098273 at 2014-08-05 15:00:43
你好,TRIzol法提RNA是加酚:氯仿:异戊醇=25:24:1(ph<5.0)好呢?还是氯仿:异戊醇=24:1,PH有要求吗?非常感谢。...

TRIzol法中,TRIzol中已经含有酚了,因此不必再加酚,用纯氯仿就可以了,PH也不用调整。
9楼2014-08-06 00:23:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 眼泪笑了23 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 313求调剂 +4 海日海日 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:54 by xiayan13521
[考研] 085600,321分求调剂 +10 大馋小子 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:25 by 544594351
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 10/500 2026-04-04 23:12 by 无际的草原
[考研] 一志愿沪9,求生物学调剂,326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 材料专硕322分 +7 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 7/350 2026-04-04 12:09 by asdhh1991
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 301求调剂 +14 A_JiXing 2026-04-01 14/700 2026-04-03 18:31 by ls刘帅
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 英一数一408,总分284,二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 土木水利328分求调剂 +6 疾风知劲草666 2026-04-02 6/300 2026-04-03 11:38 by znian
[考研] 一志愿复旦材料,英一专硕,总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 322求调剂 +5 熹僖XX 2026-03-31 6/300 2026-04-02 10:08 by 求调剂zz
[考研] 303分 0807学硕求调剂 +3 TYC3632 2026-04-01 3/150 2026-04-01 19:24 by lwk2004
信息提示
请填处理意见