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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 苯酚：氯仿：异戊醇=25：24：1如何配置？
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jianguo-

木虫 (著名写手)

[求助] 苯酚：氯仿：异戊醇=25：24：1如何配置？

关于请问这里的苯酚该如何制备啊？由于苯酚是固体，而氯仿和异戊醇应该是液体的，这个体积比中苯酚的质量浓度是多少啊？谢谢。
文献中提到phenol/chloroform/isoamyl alcohol(25:24:1,用0.1M ammonium acetate,PH=6.5)  这里提到的用醋酸铵饱和到底是什么意思啊？？？？怎么样算是饱和啊？？？？
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1楼2011-12-04 12:45:21
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回帖置顶 ( 共有3个 )

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
jianguo-(金币+15): 2011-12-04 15:04:00
西瓜: 回帖置顶 2011-12-04 21:23:53
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-04 21:24:00
苯酚要用平衡酚.....平衡酚是液体！25：24：1是体积比......0.1M ammonium acetate,PH=6.5应该是调终浓度！加相应摩尔质量醋酸铵应该即可....不过似乎一般不用这样处理
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2楼2011-12-04 13:21:47
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elbo

金虫 (小有名气)
★ ★
西瓜: 回帖置顶 2011-12-04 21:24:10
西瓜(金币+2): 鼓励应助。自己配饱和酚相当麻烦！ 2011-12-04 21:24:36
建议买液体的Tris饱和酚，固体的话自己配得过程中很容易氧化，根本不行。
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4楼2011-12-04 15:34:13
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chengq

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-12-05 18:16:08
西瓜: 回帖置顶 2011-12-05 18:16:09
其实酚有水饱和酚和tris饱和酚，它们的pH值是不同的。前者pH值<7，用于RNA的提取，后者pH值>7，用于DNA的提取。楼主注意一下。
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10楼2011-12-05 08:55:04
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小小亚杰

木虫 (正式写手)
Tris饱和酚就是250ml，在量240ml氯仿，加10ml异戊醇就行了
混匀即OK
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7楼2011-12-04 18:59:49
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tengwan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-12-07 11:42:19:
这位虫友，配液时吸取的Tris饱和酚里，就有了保护液，哪怕你吸的是Tris饱和酚的下层溶液，也不可能一点儿保护液都吸不到。我们实验室一直照此配置，用于DNA提取，效果一向很好。

是会有点。按照你这个理论来推理，就没有必要分层啊，反正每次取饱和酚的时候，总是多少能取到点上层保护液，对提取DNA是没有任何影响的

ps，你们实验室配制完酚氯仿混合液后，都不另外特意加上层保护液吗？存放哪里？能存放多长时间？
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18楼2011-12-07 16:10:18
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饼哥

木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 欢迎交流经验！ 2011-12-08 19:09:37
引用回帖:
18楼: Originally posted by tengwan at 2011-12-07 16:10:18:
是会有点。按照你这个理论来推理，就没有必要分层啊，反正每次取饱和酚的时候，总是多少能取到点上层保护液，对提取DNA是没有任何影响的

ps，你们实验室配制完酚氯仿混合液后，都不另外特意加上层保护液吗？存 ...

用Tris饱和酚配制，配完后不需要特意加保护液，直接四度静置一夜，待其分层即可。配完后四度保存，今年七月份同门配了一瓶，到现在还能用。
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爱科研，更爱小木虫！
19楼2011-12-07 21:38:12
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普通回帖

我爱沈泉

金虫 (小有名气)
我们的苯酚都是在生工买的液体啊。。。
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3楼2011-12-04 15:16:03
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aureus

新虫 (初入文坛)
我们用的也是找公司买的
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5楼2011-12-04 15:52:00
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btx362237729

金虫 (正式写手)
不用配 用的时候直接吸各自的量 哈哈
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人生最黑暗的时光终于过去了
6楼2011-12-04 18:47:15
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asznpb

木虫 (正式写手)
tris饱和酚啊，其他的都是液体，直接按体积加在一起就是了……
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显微镜下的世界很精彩！
8楼2011-12-04 21:03:01
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mingzhu392

木虫 (著名写手)
记得要在通风橱内完成，做好防护措施！
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9楼2011-12-05 08:02:23
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