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wx1119

铜虫 (小有名气)

建议购买Tris饱和酚 自己配的易氧化 经验 呵呵
11楼2011-12-05 11:28:02
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dinghonglan

新虫 (初入文坛)

固体酚在60度加热就变成液体了
12楼2011-12-06 10:23:43
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tengwan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by chengq at 2011-12-05 08:55:04:
其实酚有水饱和酚和tris饱和酚,它们的pH值是不同的。前者pH值<7,用于RNA的提取,后者pH值>7,用于DNA的提取。楼主注意一下。

注意啊注意,要RNA还是DNA
13楼2011-12-06 10:50:03
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饼哥

木虫 (正式写手)

酚是指Tris饱和酚,直接从试剂公司买就行,250ml,价格40到120不等。配时带上口罩、手套,棕色瓶,50mlTris饱和酚+48ml氯仿+2ml异戊醇,颠倒混匀(若是棕色磨口瓶,混时一定要用手堵死瓶口)后,4度静置一夜,让液体分层,使用时注意吸取下层溶液,不要吸到上层。
爱科研,更爱小木虫!
14楼2011-12-06 11:32:37
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tengwan

新虫 (初入文坛)

★
西瓜(金币+1): Good! 2011-12-08 19:09:01
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-12-06 11:32:37:
酚是指Tris饱和酚,直接从试剂公司买就行,250ml,价格40到120不等。配时带上口罩、手套,棕色瓶,50mlTris饱和酚+48ml氯仿+2ml异戊醇,颠倒混匀(若是棕色磨口瓶,混时一定要用手堵死瓶口)后,4度静置一夜,让液 ...

这个不准确啊描述,没加上层保护液,哪来的4度静置液体分层啊?

配好好,匀点原来饱和酚的上层保护液,给酚氯仿异戊醇混合液也保护上,因酚空气中易氧化

4度保存
15楼2011-12-06 12:04:30
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饼哥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by tengwan at 2011-12-06 12:04:30:
这个不准确啊描述,没加上层保护液,哪来的4度静置液体分层啊?

配好好,匀点原来饱和酚的上层保护液,给酚氯仿异戊醇混合液也保护上,因酚空气中易氧化

4度保存

这位虫友,配液时吸取的Tris饱和酚里,就有了保护液,哪怕你吸的是Tris饱和酚的下层溶液,也不可能一点儿保护液都吸不到。我们实验室一直照此配置,用于DNA提取,效果一向很好。
爱科研,更爱小木虫!
16楼2011-12-07 11:42:19
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咖啡加点糖

木虫 (小有名气)

直接买液体的Tris饱和酚
17楼2011-12-07 12:34:48
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tengwan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-12-07 11:42:19:
这位虫友,配液时吸取的Tris饱和酚里,就有了保护液,哪怕你吸的是Tris饱和酚的下层溶液,也不可能一点儿保护液都吸不到。我们实验室一直照此配置,用于DNA提取,效果一向很好。

是会有点。按照你这个理论来推理,就没有必要分层啊,反正每次取饱和酚的时候,总是多少能取到点上层保护液,对提取DNA是没有任何影响的

ps,你们实验室配制完酚氯仿混合液后,都不另外特意加上层保护液吗?存放哪里?能存放多长时间?
18楼2011-12-07 16:10:18
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饼哥

木虫 (正式写手)

★
西瓜(金币+1): 欢迎交流经验! 2011-12-08 19:09:37
引用回帖:
18楼: Originally posted by tengwan at 2011-12-07 16:10:18:
是会有点。按照你这个理论来推理,就没有必要分层啊,反正每次取饱和酚的时候,总是多少能取到点上层保护液,对提取DNA是没有任何影响的

ps,你们实验室配制完酚氯仿混合液后,都不另外特意加上层保护液吗?存 ...

用Tris饱和酚配制,配完后不需要特意加保护液,直接四度静置一夜,待其分层即可。配完后四度保存,今年七月份同门配了一瓶,到现在还能用。
爱科研,更爱小木虫!
19楼2011-12-07 21:38:12
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laokei

金虫 (正式写手)

肯定直接买Tris平衡酚就可以了,自己做饱和酚好麻烦哦!
20楼2011-12-08 11:31:59
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