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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 苯酚：氯仿：异戊醇=25：24：1如何配置？
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wx1119

铜虫 (小有名气)
建议购买Tris饱和酚 自己配的易氧化 经验 呵呵
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11楼2011-12-05 11:28:02
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dinghonglan

新虫 (初入文坛)
固体酚在60度加热就变成液体了
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12楼2011-12-06 10:23:43
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tengwan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by chengq at 2011-12-05 08:55:04:
其实酚有水饱和酚和tris饱和酚，它们的pH值是不同的。前者pH值<7，用于RNA的提取，后者pH值>7，用于DNA的提取。楼主注意一下。

注意啊注意，要RNA还是DNA
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13楼2011-12-06 10:50:03
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饼哥

木虫 (正式写手)
酚是指Tris饱和酚，直接从试剂公司买就行，250ml，价格40到120不等。配时带上口罩、手套，棕色瓶，50mlTris饱和酚+48ml氯仿+2ml异戊醇，颠倒混匀（若是棕色磨口瓶，混时一定要用手堵死瓶口）后，4度静置一夜，让液体分层，使用时注意吸取下层溶液，不要吸到上层。
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爱科研，更爱小木虫！
14楼2011-12-06 11:32:37
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tengwan

新虫 (初入文坛)
★
西瓜(金币+1): Good！ 2011-12-08 19:09:01
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-12-06 11:32:37:
酚是指Tris饱和酚，直接从试剂公司买就行，250ml，价格40到120不等。配时带上口罩、手套，棕色瓶，50mlTris饱和酚+48ml氯仿+2ml异戊醇，颠倒混匀（若是棕色磨口瓶，混时一定要用手堵死瓶口）后，4度静置一夜，让液 ...

这个不准确啊描述，没加上层保护液，哪来的4度静置液体分层啊？

配好好，匀点原来饱和酚的上层保护液，给酚氯仿异戊醇混合液也保护上，因酚空气中易氧化

4度保存
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15楼2011-12-06 12:04:30
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by tengwan at 2011-12-06 12:04:30:
这个不准确啊描述，没加上层保护液，哪来的4度静置液体分层啊？

配好好，匀点原来饱和酚的上层保护液，给酚氯仿异戊醇混合液也保护上，因酚空气中易氧化

4度保存

这位虫友，配液时吸取的Tris饱和酚里，就有了保护液，哪怕你吸的是Tris饱和酚的下层溶液，也不可能一点儿保护液都吸不到。我们实验室一直照此配置，用于DNA提取，效果一向很好。
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16楼2011-12-07 11:42:19
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咖啡加点糖

木虫 (小有名气)
直接买液体的Tris饱和酚
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17楼2011-12-07 12:34:48
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tengwan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-12-07 11:42:19:
这位虫友，配液时吸取的Tris饱和酚里，就有了保护液，哪怕你吸的是Tris饱和酚的下层溶液，也不可能一点儿保护液都吸不到。我们实验室一直照此配置，用于DNA提取，效果一向很好。

是会有点。按照你这个理论来推理，就没有必要分层啊，反正每次取饱和酚的时候，总是多少能取到点上层保护液，对提取DNA是没有任何影响的

ps，你们实验室配制完酚氯仿混合液后，都不另外特意加上层保护液吗？存放哪里？能存放多长时间？
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18楼2011-12-07 16:10:18
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饼哥

木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 欢迎交流经验！ 2011-12-08 19:09:37
引用回帖:
18楼: Originally posted by tengwan at 2011-12-07 16:10:18:
是会有点。按照你这个理论来推理，就没有必要分层啊，反正每次取饱和酚的时候，总是多少能取到点上层保护液，对提取DNA是没有任何影响的

ps，你们实验室配制完酚氯仿混合液后，都不另外特意加上层保护液吗？存 ...

用Tris饱和酚配制，配完后不需要特意加保护液，直接四度静置一夜，待其分层即可。配完后四度保存，今年七月份同门配了一瓶，到现在还能用。
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19楼2011-12-07 21:38:12
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laokei

金虫 (正式写手)
肯定直接买Tris平衡酚就可以了，自己做饱和酚好麻烦哦！
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20楼2011-12-08 11:31:59
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