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眼泪笑了23

新虫 (小有名气)

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[求助] 请问在提RNA的时候，用氯仿：异戊醇=24:1，还是用氯仿？已有4人参与

请问各位高手，在提取RNA的时候，是可以使用氯仿：异戊醇=24:1，还是可以使用氯仿？
二者有什么区别呢？加氯仿的那一步，可以剧烈震荡吗？有人说剧烈震荡回造成DNA污染？
现在室温有点高，操作在冰上进行？

请各位高手指点一二

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1楼 2014-06-11 18:28:45

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yzq6098273

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by wangyue115 at 2014-06-12 00:10:23
异戊醇的作用是调整极性，使氯仿更高效的萃取酚等有机物以及令蛋白质变性。
关于振荡的问题：如果你采用的是TRIzol一步法，剧烈振荡的确有可能使部分DNA碎片进入水相。如果是分步除杂，问题不大。
低温操作主要是 ...

你好，TRIzol法提RNA是加酚：氯仿：异戊醇=25：24：1（ph<5.0）好呢？还是氯仿：异戊醇=24：1，PH有要求吗？非常感谢。