应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩不出来，请问这是什么原因
91/1返回列表
查看: 1562  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liufang1006

木虫 (正式写手)

[求助] PCR扩不出来，请问这是什么原因 已有5人参与

我用的反应体系是10ul的，具体如下：
水：7.2
buffer：1
dNTP:0.8
模板：0.5
引物：0.2
taq酶：0.1
扩出来结果如图所示，请大家帮我分析分析一下？

PCR扩不出来，请问这是什么原因
Image0.5ul-4.5+5.1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
风雨无悔人生路！没有吃不了的苦，只有享不了的福！
1楼 2014-06-11 10:08:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-06-11 12:26:30
liufang1006: 金币+1 2014-06-12 09:03:07
在不知道模板，引物和扩增片段长度等情况的条件下，只能说引物二聚体比较严重。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-11 10:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-06-11 12:26:37
liufang1006: 金币+2 2014-06-12 09:10:31
二聚体严重，可能是退火温度的问题
当然也不排除是引物问题

看你上面的胶是跑出来了，条带不明显

你可以换下模板试下
赞一下 回复此楼
天行健
3楼2014-06-11 11:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 20:59:18
1.更换模板
2.更换了模板还是这样的话，重新设计引物吧
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-11 21:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

动力泉

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liufang1006(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-12 08:56:59
应该是退火温度太低，适当提高温度

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
好好学习
5楼2014-06-11 22:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liufang1006(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-12 08:57:06
你加的东西看不出问题。pcr关键的条件是引物Tm值和退火温度的关系。另外你也没有透露目的条带大小和你的延伸时间。
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-12 00:03:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufang1006

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by junior850621 at 2014-06-12 00:03:19
你加的东西看不出问题。pcr关键的条件是引物Tm值和退火温度的关系。另外你也没有透露目的条带大小和你的延伸时间。

我的目的条带是260，mark中最亮的是250，延伸时间是30s
赞一下 回复此楼
风雨无悔人生路！没有吃不了的苦，只有享不了的福！
7楼2014-06-12 09:10:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufang1006

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-11 11:10:57
二聚体严重，可能是退火温度的问题
当然也不排除是引物问题

看你上面的胶是跑出来了，条带不明显

你可以换下模板试下

谢谢，我将模板稀释后就扩出来了
赞一下 回复此楼
风雨无悔人生路！没有吃不了的苦，只有享不了的福！
8楼2014-06-12 09:11:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛ccw

新虫 (初入文坛)
可能引物的问题
回复此楼
9楼2014-06-30 09:55:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liufang1006 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 接受任何调剂 +4 也就是栗子 2026-04-17 4/200 2026-04-17 17:57 by Equinoxhua
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-17 8/400 2026-04-17 16:36 by wutongshun
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 271求调剂 +37 2261744733 2026-04-11 39/1950 2026-04-17 10:11 by 黑科技矿业
[基金申请] RY：中国产出的科学垃圾论文，绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 生物学调剂 +9 纸扇zhishan 2026-04-13 9/450 2026-04-15 18:28 by AN流800
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +43 xaw. 2026-04-11 44/2200 2026-04-15 12:46 by 西北望—风沙
[考研] 271求调剂 +35 2261744733 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 15:36 by zs92450
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 302求调剂 +10 易！? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭