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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：跑出这种电泳图，什么情况
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紫瓶子

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：跑出这种电泳图，什么情况 已有4人参与

那种有点弥散，一团亮，是什么原因呢？

求助：跑出这种电泳图，什么情况
20140610.jpg
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1楼 2014-06-10 16:48:19
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
紫瓶子: 金币+1, ★有帮助, 谢谢参与 2014-06-10 21:21:15
应该是胶的问题吧
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借口很贱，，，
2楼2014-06-10 17:17:16
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gyl121

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
紫瓶子(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:48:46
紫瓶子: 金币+1, ★有帮助, 感谢支持 2014-06-10 21:22:34
个人觉得是分辨率达不到的原因，应该是有2条带离的很近造成的结果，试试高浓度的琼脂糖凝胶吧，也许会有所变化
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不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力
3楼2014-06-10 18:10:40
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
紫瓶子(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:48:53
紫瓶子: 金币+1, ★有帮助, 感谢支持 2014-06-10 21:22:00
4度孵育过夜就出现弥散，如果室温孵育一小时 ，就基本上没有这种情况。

建议PCR结束后马上电泳。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-10 19:28:45
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紫瓶子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyl121 at 2014-06-10 18:10:40
个人觉得是分辨率达不到的原因，应该是有2条带离的很近造成的结果，试试高浓度的琼脂糖凝胶吧，也许会有所变化

这是1.5%跑出来的，你认为多少浓度合适呢？？目标条带大概1300bp左右
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5楼2014-06-10 21:02:45
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紫瓶子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-10 19:28:45
4度孵育过夜就出现弥散，如果室温孵育一小时 ，就基本上没有这种情况。

建议PCR结束后马上电泳。

是PCR结束后立即跑电泳的
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6楼2014-06-10 21:03:42
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紫瓶子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonew at 2014-06-10 17:17:16
应该是胶的问题吧

那为什么有的条带还算正常呢？
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7楼2014-06-10 21:04:54
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
紫瓶子: 金币+1, ★有帮助 2014-06-10 21:26:29
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-11 19:04:13
这种条带很正常，你配胶用的TAE不太好或者电泳槽中的缓冲液时间长了。把缓冲液换一换就没啥问题了。
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大家相互帮助哈
8楼2014-06-10 21:21:42
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紫瓶子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-10 21:21:42
这种条带很正常，你配胶用的TAE不太好或者电泳槽中的缓冲液时间长了。把缓冲液换一换就没啥问题了。

我明天试试，多谢
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9楼2014-06-10 21:26:19
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luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 紫瓶子 at 2014-06-10 21:26:19
我明天试试，多谢...

先用120v压5min把DNA压进胶里面，再调回正常电压。
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大家相互帮助哈
10楼2014-06-10 22:08:07
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