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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药品生产 » GMP相关 » 细胞库稳定性试验
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wangdove2011

金虫 (小有名气)

[交流] 细胞库稳定性试验 已有2人参与

各位同行，小女子现在在做细胞库的稳定性实验，现在遇到一个问题想向大家请教下：
我做的是MCB的稳定性，细胞传代到P24，每隔两个代次冻存一次，即整个周期下来冻存细胞代次为：P8\10\12\14\16\18\20\22，现在需要复苏冻存的细胞进行生产稳定性实验，现在比较纠结的问题是：
         1、这些冻存的8支细胞还有P6代共9支细胞均需要复苏吗？（能不能隔4代复苏做fed-batch，即P6\10\14\18\22）
         2、复苏后的细胞传代几次后比较适合做fed-batch？大家认可的是传代多久？
         3、为保证数据的有效性，一般一个代次的细胞在做fed-batch时需要做几个平行？

谢谢大家不吝赐教哈~~
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1楼 2014-06-03 19:32:12
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2014-10-22 22:16:04
简单回答一下。
1.不一定，要看你有限传代次数是多少，如果只有50代，那么你2个代次一做，如果是100代，那你可以4个代次一做。
2.MCB一般不会进行fed-batch的，WCB进行fed-batch的要求是最大传代限度的2/3
3.一般做2个平行，如果细胞多，多做点也是可以的。需要考虑到操作失误。
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2楼2014-06-04 13:14:26
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小鑫_J

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2014-10-22 22:16:13
都要复苏的，不过我一般做的是隔四代冻一次。
复苏后的细胞一般3-4代做fed-batch。
两个平行，考虑到操作的失误等
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3楼2014-10-22 11:07:51
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