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wangdove2011

金虫 (小有名气)

[交流] 细胞库稳定性试验 已有2人参与

各位同行,小女子现在在做细胞库的稳定性实验,现在遇到一个问题想向大家请教下:
我做的是MCB的稳定性,细胞传代到P24,每隔两个代次冻存一次,即整个周期下来冻存细胞代次为:P8\10\12\14\16\18\20\22,现在需要复苏冻存的细胞进行生产稳定性实验,现在比较纠结的问题是:
         1、这些冻存的8支细胞还有P6代共9支细胞均需要复苏吗?(能不能隔4代复苏做fed-batch,即P6\10\14\18\22)
         2、复苏后的细胞传代几次后比较适合做fed-batch?大家认可的是传代多久?
         3、为保证数据的有效性,一般一个代次的细胞在做fed-batch时需要做几个平行?

谢谢大家不吝赐教哈~~
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wolfman840

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2014-10-22 22:16:04
简单回答一下。
1.不一定,要看你有限传代次数是多少,如果只有50代,那么你2个代次一做,如果是100代,那你可以4个代次一做。
2.MCB一般不会进行fed-batch的,WCB进行fed-batch的要求是最大传代限度的2/3
3.一般做2个平行,如果细胞多,多做点也是可以的。需要考虑到操作失误。
2楼2014-06-04 13:14:26
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小鑫_J

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2014-10-22 22:16:13
都要复苏的,不过我一般做的是隔四代冻一次。
复苏后的细胞一般3-4代做fed-batch。
两个平行,考虑到操作的失误等
3楼2014-10-22 11:07:51
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