24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1211  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

答案24

木虫 (初入文坛)

高中

[求助] race的实验 胶回收 已有4人参与

我最近在做race的实验,巢式pcr结束后,虽然说是模带,但是目的带还是挺清晰的。再对pcr产物进行胶回收DNA后,经1.2%的胶检测后。dna为什么都没有了?
ps:胶回收时点样50微升   
下图是25微升体系P的结果: marker左边是5‘(目的片段大小200左右),右边是3’(目的片段大小500左右)

race的实验  胶回收
2014-05-23 1图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

认真仔细乐观的对待每一天
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-17 11:40:48
从图上看,你没有获得单一目的条带,很有可能引物设计的不够理想哦

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-06-16 09:58:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-27 18:56:24
楼主
首先,RACE的产物50ul怎么能全点呢,留一点可以接着用这个产物PCR,那条带就会像电灯泡一样亮;
然后,你这个电泳条带不是很亮,胶回收损失率会达到80%,回收回来的只有2-50ng/ul而已;
最后,建议用Qiagen公司的 PCR purification Kit试剂盒,直接将PCR产物回收即可,回收率达到90%以上
谢谢!
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-05-27 16:50:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanbobecky

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-05-27 16:50:12
楼主
首先,RACE的产物50ul怎么能全点呢,留一点可以接着用这个产物PCR,那条带就会像电灯泡一样亮;
然后,你这个电泳条带不是很亮,胶回收损失率会达到80%,回收回来的只有2-50ng/ul而已;
最后,建议用Qiagen ...

请问如果我的pcr体系是20ul,电泳检测的时候点多少样合适啊?
3楼2014-06-16 09:11:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fanbobecky at 2014-06-16 09:11:48
请问如果我的pcr体系是20ul,电泳检测的时候点多少样合适啊?...

看你的电泳检测是要做什么用。
要检测后切胶回收做后续实验的,留2uL以防万一就够了。
只是看看PCR效果的,取2~3uL电泳就够了。

RACE条带不单一很正常。可以把个条带都切出来测序看看。
5楼2014-06-16 14:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华东理工大学,080500学硕,317分,求调剂 +10 s1145 2026-03-31 10/500 2026-04-02 11:44 by Sammy2
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-02 7/350 2026-04-02 11:40 by 星空星月
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +19 Youth_ 2026-03-30 19/950 2026-04-02 11:21 by Sammy2
[考研] 262求调剂 +4 励志一定发文章 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:07 by 励志一定发文章
[考研] 292分,材料与化工,申请调剂 +19 程晴之 2026-04-01 22/1100 2026-04-02 10:29 by 氯化亚硝酰
[考研] 324求调剂 +5 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:16 by sanrepian
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-01 21:48 by chyhaha
[考研] 270求调剂 +7 小杰pp 2026-03-31 8/400 2026-04-01 21:36 by 七度不信任
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +7 烤麦芽 2026-03-27 10/500 2026-04-01 21:35 by 495374996
[考研] 324求调剂 +10 hanamiko 2026-03-26 12/600 2026-04-01 16:59 by oooqiao
[考研] 0703一志愿南师大334求调剂 +4 seven7yu 2026-03-30 4/200 2026-04-01 16:10 by oooqiao
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-01 15:39 by 好好读书。
[考研] 材料专硕322分 +9 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:30 by 无际的草原
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +15 Doleres 2026-03-31 16/800 2026-04-01 09:49 by lfj11
[考研] 070300化学354求调剂 +15 101次希望 2026-03-28 15/750 2026-03-31 17:58 by jp9609
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分,前三科223分 +11 dongfang59 2026-03-27 11/550 2026-03-31 16:51 by Wang200018
[考研] 286求调剂 +6 Faune 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:37 by jp9609
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +13 辰沐5211314 2026-03-26 13/650 2026-03-31 14:37 by 记事本2026
[考研] 334求调剂 +7 Trying] 2026-03-31 7/350 2026-03-31 12:33 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见