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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 斑马鱼的Race（快速cDNA莫端克隆）实验
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aalearner

铜虫 (初入文坛)

[求助] 斑马鱼的Race（快速cDNA莫端克隆）实验 已有1人参与

我在用RACE实验克隆斑马鱼的某个基因时发现，无论是Clonetech还是Invitrogen的通用引物的特异性很差，单独用通用引物时就能p出3、4条非特异性条带。不知大家是否做过相关实验，目前是否已有对于斑马鱼基因组特异性强的通用引物，或给点经验建议！
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春雨绵绵
1楼 2014-04-16 09:38:57
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nieqiantina

银虫 (初入文坛)
这个肯定是你RNA的质量问题，RACE对于RNA的要求还是比较高的。我用的clotech的，试剂盒的东西还是很好用的。
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2楼2014-04-17 11:48:40
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做这个，高质量的RNA是必须的，基因的富集原理一定要理解的很透彻

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3楼2014-04-17 12:13:46
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我这边的RACE情况还可以，前阵子做了十个基因的，一周左右就全拿到了，后来的测序结果也都还挺好

[ 发自小木虫客户端 ]
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aalearner
4楼2014-04-17 12:15:27
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aalearner

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:15:27
我这边的RACE情况还可以，前阵子做了十个基因的，一周左右就全拿到了，后来的测序结果也都还挺好

请问你用的是什么试剂盒，3‘端和5’端的通用引物是什么？
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春雨绵绵
5楼2014-04-17 13:29:38
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aalearner

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:13:46
做这个，高质量的RNA是必须的，基因的富集原理一定要理解的很透彻

谢谢，这个我清楚！
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春雨绵绵
6楼2014-04-17 13:34:04
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aalearner

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:15:27
我这边的RACE情况还可以，前阵子做了十个基因的，一周左右就全拿到了，后来的测序结果也都还挺好

一周克隆十个基因，难以想像。
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春雨绵绵
7楼2014-04-17 13:36:01
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