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aalearner

铜虫 (初入文坛)

[求助] 斑马鱼的Race(快速cDNA莫端克隆)实验已有1人参与

我在用RACE实验克隆斑马鱼的某个基因时发现,无论是Clonetech还是Invitrogen的通用引物的特异性很差,单独用通用引物时就能p出3、4条非特异性条带。不知大家是否做过相关实验,目前是否已有对于斑马鱼基因组特异性强的通用引物,或给点经验建议!
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春雨绵绵
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nieqiantina

银虫 (初入文坛)

这个肯定是你RNA的质量问题,RACE对于RNA的要求还是比较高的。我用的clotech的,试剂盒的东西还是很好用的。
2楼2014-04-17 11:48:40
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做这个,高质量的RNA是必须的,基因的富集原理一定要理解的很透彻

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-04-17 12:13:46
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我这边的RACE情况还可以,前阵子做了十个基因的,一周左右就全拿到了,后来的测序结果也都还挺好

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4楼2014-04-17 12:15:27
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aalearner

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:15:27
我这边的RACE情况还可以,前阵子做了十个基因的,一周左右就全拿到了,后来的测序结果也都还挺好

请问你用的是什么试剂盒,3‘端和5’端的通用引物是什么?
春雨绵绵
5楼2014-04-17 13:29:38
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aalearner

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:13:46
做这个,高质量的RNA是必须的,基因的富集原理一定要理解的很透彻

谢谢,这个我清楚!
春雨绵绵
6楼2014-04-17 13:34:04
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aalearner

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-17 12:15:27
我这边的RACE情况还可以,前阵子做了十个基因的,一周左右就全拿到了,后来的测序结果也都还挺好

一周克隆十个基因,难以想像。
春雨绵绵
7楼2014-04-17 13:36:01
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