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答案24

木虫 (初入文坛)

高中

应助: 1 (幼儿园)
金币: 3881.3
散金: 55
红花: 1
帖子: 41
在线: 33.4小时
虫号: 1720698
注册: 2012-03-27
专业: 水产生物遗传育种学

[求助] race的实验胶回收已有4人参与

我最近在做race的实验，巢式pcr结束后，虽然说是模带，但是目的带还是挺清晰的。再对pcr产物进行胶回收DNA后，经1.2%的胶检测后。dna为什么都没有了？
ps:胶回收时点样50微升
下图是25微升体系P的结果： marker左边是5‘（目的片段大小200左右），右边是3’（目的片段大小500左右）

2014-05-23 1图.jpg

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认真仔细乐观的对待每一天

1楼2014-05-27 16:17:50

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

fanbobecky

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 420.8
帖子: 11
在线: 7.7小时
虫号: 2994816
注册: 2014-02-25
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-05-27 16:50:12
楼主
首先，RACE的产物50ul怎么能全点呢，留一点可以接着用这个产物PCR，那条带就会像电灯泡一样亮；
然后，你这个电泳条带不是很亮，胶回收损失率会达到80%，回收回来的只有2-50ng/ul而已；
最后，建议用Qiagen ...

请问如果我的pcr体系是20ul，电泳检测的时候点多少样合适啊？

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