24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1205  |  回复: 6

答案24

超级版主

高中

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] race的实验 胶回收 已有4人参与

我最近在做race的实验,巢式pcr结束后,虽然说是模带,但是目的带还是挺清晰的。再对pcr产物进行胶回收DNA后,经1.2%的胶检测后。dna为什么都没有了?
ps:胶回收时点样50微升   
下图是25微升体系P的结果: marker左边是5‘(目的片段大小200左右),右边是3’(目的片段大小500左右)

race的实验  胶回收
2014-05-23 1图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

认真仔细乐观的对待每一天
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

新虫

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-27 18:56:24
楼主
首先,RACE的产物50ul怎么能全点呢,留一点可以接着用这个产物PCR,那条带就会像电灯泡一样亮;
然后,你这个电泳条带不是很亮,胶回收损失率会达到80%,回收回来的只有2-50ng/ul而已;
最后,建议用Qiagen公司的 PCR purification Kit试剂盒,直接将PCR产物回收即可,回收率达到90%以上
谢谢!
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-05-27 16:50:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanbobecky

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-05-27 16:50:12
楼主
首先,RACE的产物50ul怎么能全点呢,留一点可以接着用这个产物PCR,那条带就会像电灯泡一样亮;
然后,你这个电泳条带不是很亮,胶回收损失率会达到80%,回收回来的只有2-50ng/ul而已;
最后,建议用Qiagen ...

请问如果我的pcr体系是20ul,电泳检测的时候点多少样合适啊?
3楼2014-06-16 09:11:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-17 11:40:48
从图上看,你没有获得单一目的条带,很有可能引物设计的不够理想哦

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-06-16 09:58:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by fanbobecky at 2014-06-16 09:11:48
请问如果我的pcr体系是20ul,电泳检测的时候点多少样合适啊?...

看你的电泳检测是要做什么用。
要检测后切胶回收做后续实验的,留2uL以防万一就够了。
只是看看PCR效果的,取2~3uL电泳就够了。

RACE条带不单一很正常。可以把个条带都切出来测序看看。
5楼2014-06-16 14:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

804371539

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

请问楼主怎么确定3’产物大小呢?急急急
6楼2016-04-01 22:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

prthefu

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

我也要做race,能不能以后多交流,估计我有好多问题想跟你请教呢

发自小木虫Android客户端
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
7楼2016-04-02 00:50:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 答案24 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京科技,085601总分305求调剂 +7 半生瓜! 2026-04-01 7/350 2026-04-01 20:33 by liu823948201
[考研] 0817化工学硕调剂 +11 努力上岸中! 2026-03-31 11/550 2026-04-01 20:30 by 赖春艳
[考研] 318求调剂 +5 吸喵有害笙命 2026-04-01 5/250 2026-04-01 20:05 by jp9609
[考研] 273求调剂 +18 李芷新1 2026-03-31 18/900 2026-04-01 19:12 by 更好的躺平
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-01 15:39 by 好好读书。
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-03-28 7/350 2026-04-01 15:32 by 王亮_大连医科大
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-03-31 6/300 2026-04-01 14:16 by 夜空空哦
[考研] 322求调剂 +8 三水sss 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:19 by 唐沐儿
[考研] 333求调剂 +4 阿科逸 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:11 by jp9609
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 367求调剂 +7 芋泥啵啵… 2026-03-28 7/350 2026-03-31 14:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +13 辰沐5211314 2026-03-26 13/650 2026-03-31 14:37 by 记事本2026
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 8/400 2026-03-31 08:53 by Qshers
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂!!! +5 贝呗钡钡 2026-03-30 5/250 2026-03-30 18:16 by 无际的草原
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
信息提示
请填处理意见