| 查看: 2785 | 回复: 3 | |||
swimmingcrab铜虫 (小有名气)
|
[求助]
质粒酶切后割胶回收效率低 已有2人参与
|
|
各位虫友： 小弟最近准备进行组织原位杂交实验，在探针合成过程中需要对之前回收的质粒进行酶切，割胶回收作为探针合成的模板。但是用到的T7和SP6转录酶要求模板量在20ul体系中要达到1ug。小弟已经用了120ul体系的酶切产物进行割胶回收，回收片段大小在3800bp左右，回收前的电泳图亮度也还可以，但是最后30ul 洗脱液洗脱后得到的回收产物浓度却还在10ng/ul 以下，用的是takara家的DNA胶回收试剂盒。已经尽量用了小的胶块，胶也完全融了，融胶过柱子的时候重复了一遍，最后洗脱也重复了一遍。洗脱液按照使用说明60度预热了。不知道有什么办法可以提高割胶回收的效率啊。求破啊。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有57人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产物回收胶的保存
已经有15人回复
- PCR结果不好，胶回收后浓度很低
已经有10人回复
- PET-32A重组质粒构建
已经有20人回复
- 关于双酶切的酶的失活问题
已经有6人回复
- BamHI,SmaI平末端粘性末端连接问题
已经有11人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 关于双酶切作用时间
已经有10人回复
- 求助--双酶切连接构质粒
已经有15人回复
- 分步酶切 回收不到片段
已经有4人回复
- 双酶切后目的条带的疑问？
已经有8人回复
- 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
已经有15人回复
- 电泳条带很淡，能用于割胶回收吗
已经有7人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 载体总是连不上，已经一个月了~真心求助，详细在帖子里
已经有7人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- PCR产物纯化与回收
已经有10人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【求助/交流】目的基因与pPIC9K连接的问题！
已经有9人回复
- 【求助/交流】DNA割胶纯化
已经有7人回复
- 【求助/交流】目的片段与载体连接不上
已经有16人回复
- 【求助/交流】如何提高连接效率？
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系
已经有7人回复
2楼2014-05-15 16:48:04
吹着泡泡的夏
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 717.8
- 帖子: 101
- 在线: 19.7小时
- 虫号: 3126114
- 注册: 2014-04-10
- 性别: GG
- 专业: 食品加工学基础
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
swimmingcrab(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-17 12:25:43
感谢参与，应助指数 +1
swimmingcrab(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-17 12:25:43
3楼2014-05-15 17:14:21
4楼2014-07-17 11:06:49
