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swimmingcrab铜虫 (小有名气)
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质粒酶切后割胶回收效率低已有2人参与
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各位虫友： 小弟最近准备进行组织原位杂交实验，在探针合成过程中需要对之前回收的质粒进行酶切，割胶回收作为探针合成的模板。但是用到的T7和SP6转录酶要求模板量在20ul体系中要达到1ug。小弟已经用了120ul体系的酶切产物进行割胶回收，回收片段大小在3800bp左右，回收前的电泳图亮度也还可以，但是最后30ul 洗脱液洗脱后得到的回收产物浓度却还在10ng/ul 以下，用的是takara家的DNA胶回收试剂盒。已经尽量用了小的胶块，胶也完全融了，融胶过柱子的时候重复了一遍，最后洗脱也重复了一遍。洗脱液按照使用说明60度预热了。不知道有什么办法可以提高割胶回收的效率啊。求破啊。。。 |
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4楼2014-07-17 11:06:49
2楼2014-05-15 16:48:04
吹着泡泡的夏
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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swimmingcrab(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-17 12:25:43
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3楼2014-05-15 17:14:21