应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
汕头大学海洋科学接受调剂
161/1返回列表
查看: 2127  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)

[交流] 割胶回收后的DNA片段如何做克隆？

割胶回收后的DNA片段如何做克隆？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-07-26 19:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:18
如果两端有合适的位点，可以酶切载体后连接克隆。
如果对于序列信息一无所知，可以利用taq酶在两端加A，克隆到T载体中，做进一步分析~~~
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-07-26 20:15:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-26 21:57:38
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:21
直接酶切。连接到终载体中

或者直接连入中间过渡载体。测序验证后在做后续酶切连接。
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-26 19:39:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接切酶应该可以吧。
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-26 20:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thunder00

木虫 (著名写手)
运用T载体克隆
回复此楼
5楼2012-07-26 21:46:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

691740067

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2012-07-27 18:27:28
如果是taq酶扩的，直接连T载体最简单。
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-26 22:00:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨硕菲

木虫 (正式写手)
顶一个
回复此楼
7楼2012-07-26 22:05:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
8楼2012-07-27 10:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuzhiming at 2012-07-26 19:39:18
直接酶切。连接到终载体中

或者直接连入中间过渡载体。测序验证后在做后续酶切连接。

pcr产物回收的DNA片段
赞一下 回复此楼
9楼2012-07-27 11:58:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0008meng

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2012-07-26 20:15:25
如果两端有合适的位点，可以酶切载体后连接克隆。
如果对于序列信息一无所知，可以利用taq酶在两端加A，克隆到T载体中，做进一步分析~~~

很好
回复此楼
10楼2012-07-27 13:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

动力泉

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
选择合适的载体连接后，转化就行了。转化后可以酶切验证或者pcr验证
赞一下 回复此楼
12楼2012-07-29 11:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云破月来xxz

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
uuu555000: 金币+2 2012-07-29 12:04:17
一般用普通Taq酶3‘末端会加A，可以T载体连接，效率比较高，可以做一个亚克隆，然后提质粒获得克隆。
赞一下 回复此楼
13楼2012-07-29 12:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得PCR产物回收后，直接转化，加培养液，涂板就可以了，酶切啥的都是浮云
赞一下 回复此楼
14楼2012-07-29 12:20:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)
★
uuu555000: 金币+1 2012-07-29 15:14:36
引用回帖:
14楼: Originally posted by trizol11 at 2012-07-29 12:20:01
我觉得PCR产物回收后，直接转化，加培养液，涂板就可以了，酶切啥的都是浮云

对了，在转化前做个连接，
赞一下 回复此楼
15楼2012-07-29 12:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by trizol11 at 2012-07-29 12:21:45
对了，在转化前做个连接，...

连接加的试剂量着么算
赞一下 回复此楼
16楼2014-12-24 19:49:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
zhengkning11楼
2012-07-27 13:43   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 uuu555000 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +8 慕绝cc 2026-04-09 8/400 2026-04-13 14:08 by 张zhihao
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +12 小熊睿睿_s 2026-04-11 16/800 2026-04-12 16:28 by 钰璞
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂，接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭